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专利号: 2020114505153
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-10-10
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种腈水合酶突变体,其特征在于,含有α亚基、β亚基以及调控蛋白;

所述α亚基的氨基酸序列如SEQ ID NO.1;

所述β亚基的氨基酸序列如SEQ ID NO.4或SEQ ID NO.5;

所述调控蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.3。

2.编码权利要求1所述腈水合酶突变体的基因。

3.含有权利要求2所述基因的重组载体。

4.表达权利要求1所述腈水合酶突变体的微生物细胞。

5.如权利要求4所述的微生物细胞,其特征在于,所述微生物细胞包括大肠杆菌。

6.如权利要求4或5所述的微生物细胞,其特征在于,所述细胞是以大肠杆菌BL21为宿主,以pET系列质粒为载体。

7.如权利要求6所述的微生物细胞,其特征在于,所述质粒为pET‑24(+)。

8.一种提高腈水合酶酶活力的方法,其特征在于,是将来源于温泉热碱芽孢杆菌(Caldalkalibacillus thermarum)TA2.A1的腈水合酶的β亚基的氨基酸序列的第48位亮基酸突变为天冬氨酸或组氨酸;β亚基的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

9.一种生产腈水合酶的方法,其特征在于,将表达权利要求1所述腈水合酶突变体的微生物细胞接种于LB培养基中,37℃培养至OD600为0.6‑0.8时,加入诱导剂IPTG于24℃诱导

12‑16 h。

10.权利要求1所述的腈水合酶突变体或权利要求4所述的微生物细胞在生产含烟酰胺的产品中的应用。