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专利号: 2020116032900
申请人: 浙江海洋大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 测量;测试
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种枝角类壳瓣间距的显微测量方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)10×TAE缓冲液的配制:向1L烧杯中加入600mL蒸馏水,分别称取48.4g Tris和3.7g二水合乙二胺四乙酸二钠溶于蒸馏水中,充分搅拌均匀;在混合溶液中加入11.4mL乙酸,充分搅拌均匀;加蒸馏水定容至1L,室温下保存于棕色瓶中;

(2)1×TAE缓冲液的配制:向1L烧杯中加入900mL蒸馏水,加入100mL步骤(1)中的10×TAE缓冲液,充分混匀,室温下保存于棕色瓶中;

(3)琼脂糖凝胶的制备:将琼脂糖溶于步骤(2)的1×TAE缓冲液中,置微波炉中加热至完全溶化,取出搅拌均匀;

(4)灌胶:将步骤(3)中的琼脂糖凝胶中放入温度计,待琼脂糖凝胶冷却至50‑58℃,倒入电泳槽水平板中;

(5)样品固定:待步骤(4)中琼脂糖凝胶温度降低,用胶头滴管将枝角类个体由养殖水体中转移至琼脂糖凝胶中,直至琼脂糖凝胶冷却;

(6)样品分离:将步骤(5)中含有枝角类样品的琼脂糖凝胶切成立方体;

(7)显微测量:将步骤(6)中的立方体置于光学显微镜下,体宽面向上,并拍照,同时在相同倍镜下对1mm标尺进行拍照,最后利用软件ImageJ对照片中的壳间距m进行测量。

2.根据权利要求1所述的一种枝角类壳瓣间距的显微测量方法,其特征在于,步骤(3)中,所述琼脂糖质量为0.5‑0.6g;所述1×TAE缓冲液体积为30‑40mL。

3.根据权利要求1所述的一种枝角类壳瓣间距的显微测量方法,其特征在于,步骤(4)中,所述琼脂糖凝胶冷却温度为55℃。

4.根据权利要求1所述的一种枝角类壳瓣间距的显微测量方法,其特征在于,步骤(5)中,所述温度降低为温度降至38℃。

5.根据权利要求1所述的一种枝角类壳瓣间距的显微测量方法,其特征在于,步骤(5)中,所述胶头滴管规格为90mm或100mm。

6.根据权利要求1所述的一种枝角类壳瓣间距的显微测量方法,其特征在于,步骤(6)中,所述立方体分别以枝角类的体长X、壳宽Y和体宽Z为边长切割,每个立方体中含有一个枝角类个体。