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专利号: 2021100770919
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-10-10
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种氨基葡萄糖‑6磷酸合成酶(glmS)突变体,其特征在于,是将氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的野生glmS的第39位和149位的丙氨酸突变为苏氨酸,第211位的天冬氨酸突变为天冬酰胺,第250位的精氨酸突变为半胱氨酸以及第472位的甘氨酸突变为丝氨酸。

2.一种编码权利要求1所述的氨基葡萄糖‑6磷酸合成酶突变体的基因。

3.根据权利要求2所述的基因,其特征在于,所述的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。

4.一种携带权利要求2所述的基因的表达载体。

5.一种表达权利要求1所述的氨基葡萄糖‑6磷酸合成酶突变体的细胞。

6.一种生产乙酰氨基葡萄糖的方法,其特征在于,所述的方法是以权利要求1所述的氨基葡萄糖‑6磷酸合成酶突变体为催化剂,催化葡萄糖生产乙酰氨基葡萄糖。

7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述的方法具体是以大肠杆菌为宿主,重组表达编码所述的氨基葡萄糖‑6磷酸合成酶突变体的基因,得到重组菌;将重组大肠杆菌经种子培养基活化后转入发酵培养基,于35~38℃、pH=6~8条件下培养,OD600达到18~22时加入IPTG诱导氨基葡萄糖‑6磷酸合成酶突变体的表达,使重组菌以葡萄糖为底物生产乙酰氨基葡萄糖。

8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,种子培养基按g/L计含有:胰蛋白胨5 15,~酵母粉3 7,NaCl 8 12。

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9.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,发酵培养基按g/L计含有:胰蛋白胨10 15,~酵母粉20 30,磷酸氢二钾12 13,磷酸二氢钾2 3,甘油2 6,葡萄糖流加。

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10.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,所述的IPTG的浓度为0.2 0.6 mM。

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