1.一种提高酿酒酵母工程菌脂肪酸乙酯产量的方法,其特征在于,包括如下步骤:在酿酒酵母宿主中,阻断甾醇酯途径、三酰基甘油途径和β氧化途径,并表达了蜡酯合成酶,构建得到产脂肪酸乙酯的酿酒酵母工程菌;
在所述的酿酒酵母工程菌发酵培养过程中,发酵30~40h时一次性补加1~3%菜籽油并且开始按照6~10mL/h的流速流加乙醇;并在发酵罐中葡萄糖浓度低于4~6g/L后,开始补加葡萄糖,将发酵罐葡萄糖浓度维持在5~10g/L,进行发酵培养,得到含有脂肪酸乙酯的发酵液。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,阻断甾醇酯途径是通过敲除甾醇酰基转移酶ARE1和ARE2的编码基因。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,阻断三酰基甘油途径是通过敲除甘油酰基转移酶DGA1和LRO1的编码基因。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,阻断β氧化途径是通过敲除长链脂肪酸转运体PXA2的编码基因。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的蜡酯合成酶WS2的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,在发酵培养过程中,pH维持在5~6,发酵前
30~40h转速为180~220rpm,空气流量2~3vvm,30~40h后转速为350~450rpm,空气流量4~6vvm。
7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,在发酵培养之前,将所述的酿酒酵母工程菌活化后在种子培养基中培养得到种子液,再将种子液接种于发酵培养基中进行发酵培养。
8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,所述的种子培养基为(g/L):酵母粉5~15,蛋白胨15~25,葡萄糖15~25。
9.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,所述的发酵培养基为(g/L):葡萄糖50~
70、YNB 6~7、酵母粉15~20、蛋白胨2~4、K2HPO4 7~8、KH2PO4 9~10、醋酸2~4。