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专利号: 202110137557X
申请人: 北部湾大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 医学或兽医学;卫生学
更新日期:2024-02-23
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种卵形鲳鲹源无乳链球菌DNA疫苗,其特征是,该疫苗为以pcDNA3.1(+)为载体,含有无乳链球菌internalin基因片段的重组真核质粒,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。

2.权利要求1所述卵形鲳鲹源无乳链球菌DNA疫苗的制备方法,包括以下步骤:

1)根据internalin基因的核苷酸序列设计引物,并进行PCR扩增,得到PCR产物;

2)所得PCR产物与pMD‑18T载体连接,转化大肠杆菌DH5α,PCR检测筛选出阳性克隆菌;

将所得阳性克隆菌扩大培养,提取质粒做双酶切及DNA测序验证,得到pMD‑internalin重组质粒;

3)将pcDNA3.1(+)质粒和pMD‑internalin重组质粒分别用限制性内切酶EcoR I和Xho I酶切,酶切产物用T4 DNA连接酶连接,之后转化大肠杆菌DH5α,PCR检测筛选出阳性克隆菌并提取质粒做双酶切及DNA测序验证,构建得到pcDNA‑internalin重组真核质粒,即为卵形鲳鲹源无乳链球菌DNA疫苗。

3.根据权利要求2所述的制备方法,其特征是,步骤1)中,所述internalin基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。

4.根据权利要求2或3所述的制备方法,其特征是,步骤1)中,根据internalin基因的核苷酸序列设计的引物分别如SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示。

5.权利要求1所述卵形鲳鲹源无乳链球菌DNA疫苗在制备鱼类抗无乳链球菌药物中的应用。

6.根据权利要求5所述的应用,其特征是,所述的鱼类为卵形鲳鲹。