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专利号: 2021101465716
申请人: 沈阳农业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 有机化学〔2〕
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种新二肽类化合物Xenordipeptide,其特征是:所述二肽类化合物Xenordipeptide的分子式为C15H23N3O4;所述二肽类化合物Xenordipeptide的结构式为:

2.根据权利要求1所述的一种新二肽类化合物Xenordipeptide的制备方法,其特征是:包括以下步骤:

(1)将嗜线虫致病杆菌接种至NBTA鉴别培养基中,培养活化并分离获得蓝绿色初生型菌株;

所述嗜线虫致病杆菌菌种保藏单位为中国科学院微生物研究所菌种保藏中心,保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号,保藏编号为CGMCC No.20308,保藏日期为2020年07月07日;分类命名为Xenorhabdus nematophila;

(2)将初生型菌株接种至LB液体培养基中,在28℃、180rpm条件下培养12h作为一级种6

子发酵液,所述一级种子发酵液的浓度为1‑6×10个/mL;

(3)将一级种子发酵液接种至M液体培养基中,所述一级种子发酵液与M液体培养基的添加体积比为1:5‑1:20,在28℃、180rpm条件下培养12h获得二级种子发酵液;

所述M液体培养基的组成为:葡萄糖6.13g/L,蛋白胨21.29g/L,硫酸镁1.50g/L,硫酸铵

2.46g/L,磷酸二氢钾0.86g/L,磷酸氢二钾1.11g/L,硫酸钠1.72g/L,蒸馏水1.00L,pH值

7.2‑7.6;

(4)将二级种子发酵液接种至加有Amberlite XAD 16大孔吸附树脂的M液体培养基中,在28℃、180rpm条件下培养发酵5d,所述二级种子发酵液与M液体培养基的添加体积比为1:

5‑1:20;所述大孔吸附树脂体积为发酵液的2%‑10%;

(5)收集步骤(4)发酵液中的大孔吸附树脂,清洗并烘干大孔吸附树脂,使用甲醇浸泡树脂4次,每次浸泡3h,收集浸提液,浓缩得到甲醇浸膏F1;

(6)将浸膏F1使用水、甲醇、二氯甲烷体系(V二氯甲烷:V甲醇:V水=2:1:1)进行萃取4次,收集二氯甲烷萃取液并浓缩得到二氯甲烷浸膏F2;

(7)对浸膏F2进行硅胶柱层析,使用四倍体积的二氯甲烷、二氯甲烷:甲醇=100:2、二氯甲烷:甲醇=100:4、二氯甲烷:甲醇=100:8、二氯甲烷:甲醇=100:16、二氯甲烷:甲醇=

1:1、甲醇,浓缩二氯甲烷:甲醇=100:8部分洗脱液,得到浸膏F3;

(8)对浸膏F3进行凝胶柱层析,流动相为甲醇:二氯甲烷=1:1,合并15‑21组分最终得到浸膏F4;

(9)使用高效液相色谱法,色谱柱:EclipseXDB‑C18(9.4×250mm),流动相为24%甲醇、流速为3mL/min的条件下对浸膏F4进行分离,在254nm检测波长下保留时间为6.28min的主要成分为二肽类化合物Xenordipeptide。

3.根据权利要求1所述的一种新二肽类化合物Xenordipeptide的应用,其特征是:所述二肽类化合物Xenordipeptide具有杀虫作用,用于防治南方根结线虫或温室白粉虱。

4.根据权利要求1所述的一种新二肽类化合物Xenordipeptide的应用,其特征是:所述二肽类化合物Xenordipeptide具有杀菌作用,用于防治大肠杆菌或白色念珠菌。