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专利号: 2021101501125
申请人: 湖北大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 有机化学〔2〕
更新日期:2024-08-23
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种五环三萜皂苷类化合物的提取分离方法,其特征在于,所述五环三萜皂苷类化合物的提取分离方法包括:

步骤一,将5kg干燥华中枸骨根,适当粉碎后用95%乙醇20L在室温下浸渍提取3次,经旋转蒸发仪减压浓缩后得总浸膏;

步骤二,向得到的总浸膏中加入水形成水混悬液,分别用石油醚PE、乙酸乙酯EtOAc和正丁醇n‑BuOH依次萃取,减压浓缩,分别得到石油醚萃取部位、乙酸乙酯萃取部位和正丁醇萃取部位;

步骤三,取乙酸乙酯萃取部位经硅胶柱层析,用(100:0)‑(5:1)的PE‑EtOAc 和(100:

0)‑(1:1)的CH2Cl2‑MeOH依次梯度洗脱,得到11个流分B1~B11;

步骤四,上步所述流分B10先采用反相硅胶柱层析,经甲醇‑水梯度洗脱,然后采用半制备高效液相色谱甲醇/水等度洗脱得第一种化合物;所述流分B11经反相硅胶柱层析,利用甲醇‑水梯度洗脱和半制备高效液相色谱制备得到第二种化合物;

其中,第一种化合物为3β‑O‑[α‑L‑吡喃鼠李糖(1→2)‑α‑L‑吡喃阿拉伯糖]‑泰国树脂酸,分子式为:

第二种化合物为3β‑O‑[α‑L‑吡喃鼠李糖(1→2)‑α‑L‑吡喃阿拉伯糖]‑23‑羟基‑坡模酸,分子式为:

2.如权利要求1所述的五环三萜皂苷类化合物的提取分离方法,其特征在于,步骤三进行中,并列进行以下步骤:

取正丁醇萃取部位采用D101大孔吸附树脂柱层析分离,分别用水、30%乙醇、50%乙醇、

90%乙醇洗脱;取50%乙醇洗脱流分20g经硅胶柱层析,(10:1)‑(0:1)的CH2Cl2‑MeOH梯度洗脱,得到6个次级流分C1‑C6。

3.如权利要求2所述的五环三萜皂苷类化合物的提取分离方法,其特征在于,步骤四进行中,并列进行以下步骤:

所述流分C4先采用反相硅胶柱层析,经甲醇‑水梯度洗脱,然后采用半制备高效液相色谱经甲醇/水等度洗脱得第三种化合物;所述流分C6直接采用半制备高效液相色谱经甲醇/水等度洗脱得到第四种化合物;

第三种化合物为3β‑O‑[β‑D‑吡喃木糖(1→2)‑β‑D‑吡喃葡萄糖(1→3)‑2‑O‑乙酰基‑α‑L吡喃阿拉伯糖]‑23‑羟基‑坡模酸,分子式为:;

第四种化合物为3β‑O‑[β‑D‑吡喃葡萄糖(1→3)‑α‑L‑吡喃鼠李糖(1→2)‑α‑L‑吡喃阿拉伯糖]‑23‑羟基‑坡模酸,分子式为:。

4.如权利要求1、2或3所述的五环三萜皂苷类化合物的提取分离方法,其特征在于,步骤四制备第一种化合物中,甲醇‑水梯度洗脱为10%MeOH‑90%MeOH;所述半制备高效液相色谱为等度洗脱色谱条件为MeOH/H2O,69:31,v:v,3.5mL/min,tR = 26.3 min;

步骤四制备第二种化合物中,甲醇‑水梯度洗脱为10%MeOH‑90%MeOH;所述半制备高效液相色谱为等度洗脱色谱条件为MeOH/H2O,68:32,v:v,3.5mL/min,tR = 20.4 min;

步骤四制备第三种化合物中,反相硅胶柱层析采用甲醇‑水17:83;v:v,15mL/min 洗脱;所述半制备高效液相色谱为等度洗脱色谱条件为MeOH/H2O,68:32,v:v,3.5mL/min,tR = 

19.1 min;

所述步骤四制备第四种化合物,次级流分C6直接采用半制备高效液相色谱的色谱条件为甲醇/水,65:35,v:v3.5mL/min,tR = 29.8 min。