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专利号: 2021102066342
申请人: 沈阳农业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.无刺黑果枸杞蔗糖合酶SUS基因,它的碱基序列如序列表SEQ ID NO .1所示。

2.一种转基因植物表达载体质粒,它是在植物表达载体中插入了权利要求1所述的无刺黑果枸杞蔗糖合酶SUS基因。

3.一种转基因植物表达载体质粒,它是在植物表达载体中插入了SUS +X 融合基因,X 代表转基因目的基因,SUS基因为如序列表SEQ ID NO.1所示的基因。

4.根据权利要求3所述的一种转基因植物表达载体质粒,其特征在于:所述的X 为GFP基因。

5.根据权利要求2、3或4所述的一种转基因植物表达载体质粒,其特征在于:所述的植物表达载体为pRI101AN。

6.一种重组农杆菌,它转化了权利要求2或3所述的一种转基因植物表达载体质粒。

7.根据权利要求6所述的一种重组农杆菌,其特征在于:所述的农杆菌为EHA105或LBA4404。

8.一种黑果枸杞稳定遗传转化体系,它包括:

1)取黑果枸杞叶尖外植体预培养1 2 d,加入权利要求5所述的重组农杆菌侵染,所述~的预培养的培养基由4 .74 g/l的 MS干粉 、40 g/l的蔗糖和4 .8 g/l的琼脂组成;

2)侵染后,接种到共培养培养基中,暗培养,直至叶片外植体周围长出白色农杆菌;所述的共培养培养基由4 .74 g/l的MS干粉、40g/l的蔗糖、4 .8g/l的琼脂和100μM AS组成;

3)共培养后,用含有500 mg/l Cef的无菌水清洗黑果枸杞叶片外植体;将外植体接种到选择培养基,培养至开始生芽形成完整抗性小植株;所述的选择培养基由4 .74g/l的MS干粉、40 g/l的蔗糖、4 .8g/l的琼脂、3 mg/l的Kana和300mg/l的Cef组成;

4)步骤3)所述的抗性小植株的芽长至高度4  .5 5  .5cm,剪取1  .5 2  .5cm带顶芽茎,~ ~接种到抗性生根培养基中,培养至芽能够生根并能正常生长;所述的抗性生根培养基由2 .37g/l的MS干粉、20g/l的蔗糖、4 .8 g/l的琼脂、5 mg/l的Kana、300 mg/l的Cef组成。