1.一种利用反蛋白石水凝胶薄膜检测碱性磷酸酶的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)制备反蛋白石水凝胶薄膜;
(2)将对硝基苯磷酸二钠在40~70℃预热10min,并加入激活剂与碱性磷酸酶溶液,混合反应后,得到含有p‑NP分子的反应液;
(3)将反蛋白石水凝胶薄膜置入反应液中,反应后反蛋白石水凝胶薄膜颜色发生变化。
2.根据权利要求1所述的利用反蛋白石水凝胶薄膜检测碱性磷酸酶的方法,其特征在于,激活剂采用镁离子、钙离子或钡离子。
3.根据权利要求1所述的利用反蛋白石水凝胶薄膜检测碱性磷酸酶的方法,其特征在于,激活剂的浓度为5~25mM。
4.根据权利要求1~3任意一项所述的利用反蛋白石水凝胶薄膜检测碱性磷酸酶的方法,其特征在于,步骤(1)具体包括以下步骤:(1.1)制备蛋白石结构的光子晶体模板;
(1.2)将聚甲基丙烯酸羟乙酯、乙二醇二甲基丙烯酸酯、溶剂及2‑羟基‑2‑甲基苯丙醇进行混合,制备成前驱液;聚甲基丙烯酸羟乙酯和乙二醇二甲基丙烯酸酯的摩尔比为(2~
5):(1~2);
(1.3)以夹心层的方法将前驱液渗入光子晶体模板的缝隙,经紫外聚合反应后除去光子晶体模板,得到具有有序大孔结构的反蛋白石水凝胶薄膜。
5.根据权利要求4所述的利用反蛋白石水凝胶薄膜检测碱性磷酸酶的方法,其特征在于,溶剂采用无水甲醇或无水乙醇。
6.根据权利要求4所述的利用反蛋白石水凝胶薄膜检测碱性磷酸酶的方法,其特征在于,用氢氟酸除去光子晶体模板。
7.根据权利要求4所述的利用反蛋白石水凝胶薄膜检测碱性磷酸酶的方法,其特征在于,步骤(1.1)具体为:用乙醇将单分散的二氧化硅微球配成浓度为5%(v/v)的溶液,用垂直自组装法得到蛋白石结构的光子晶体模板。
8.根据权利要求4所述的利用反蛋白石水凝胶薄膜检测碱性磷酸酶的方法,其特征在于,步骤(1.3)具体为:将配好的前驱液通入氮气去除多余气体后,在毛细管力的作用下渗透在光子晶体模板缝隙,采用“夹层法”给予压力,然后在170w的紫外灯下照射3h发生聚合反应;
将固化后的夹层结构在5%的氢氟酸溶液下浸泡,除去光子晶体模板,得到具有有序大孔结构的反蛋白石水凝胶薄膜。