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专利号: 2021102972120
申请人: 华南农业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.大豆低硫胁迫特异响应基因,其特征在于,包括GmSHM1、GmSHM2、GmAPR1、GmAPR2、GmAPR3、GmSSM1或GmSDI2中一个或多个,其基因组序列依次如SEQ ID NO:1~7所示,cDNA序列依次如SEQ ID NO:8~14所示。

2.权利要求1所述大豆低硫胁迫特异响应基因作为分子标记在大豆低硫养分胁迫分子诊断中的应用。

3.用于检测权利要求1所述大豆低硫胁迫特异响应基因表达量的检测引物。

4.根据权利要求3所述检测引物,其特征在于,所述检测引物为定量PCR引物,包括分别检测GmSHM1、GmSHM2、GmAPR1、GmAPR2、GmAPR3、GmSSM1、GmSDI2的上游引物和下游引物,其核苷酸序列依次如SEQ ID NO:15~28所示。

5.权利要求3或4所述检测引物在大豆低硫养分胁迫分子诊断或在制备大豆低硫养分胁迫分子诊断试剂盒中的应用。

6.一种大豆低硫养分胁迫分子诊断方法,其特征在于,包括如下步骤:S1.采集待测大豆根、叶,提取RNA,反转录成cDNA;

S2.以步骤S1所述cDNA为模板,权利要求4所述引物进行定量PCR检测;根据基因是否上调表达判断待测大豆是否受低硫胁迫。

7.根据权利要求6所述方法,其特征在于,步骤S2所述定量PCR所述反应体系为:2×SYBR Green PCR master mix 10μm,qF 0.4μm,qR 0.4μm,cDNA模板2μm,Mili‑Q水补至20μm。

8.根据权利要求6所述方法,其特征在于,步骤S2所述定量PCR所述反应体系为:95℃

1min;95℃15s,60℃15s,72℃30s,40个循环。

9.一种用于大豆低硫养分胁迫分子诊断的试剂或试剂盒,其特征在于,包含权利要求3或4所述检测引物。