1.一种免疫磁性表面增强拉曼基底检测丝素蛋白的方法，其特征在于包括以下步骤：

1）称取5‑6g FeCl3·6H2O和2‑4gFeSO4·7H2O溶解在蒸馏水中，将溶液倒入容器中，在充氮气的条件下搅拌至溶解；加入3‑5gNaOH，70‑90℃水浴持续搅拌0.5‑1.5h制得Fe3O4磁性纳米颗粒；

2）称取200 mg Fe3O4于容器中，加入15‑20mL浓硝酸，超声10‑30 min，随后水洗，加入

15‑25 mL无水乙醇，35‑45mL去离子水及 3‑5 mL氨水超声10‑30min后取出，搅拌下缓慢滴加3‑4mL TEOS， 持续搅拌3‑5h，随后乙醇洗，水洗，转移到比色皿中， 55‑65℃条件下真空干燥1‑3h得到Fe3O4@SiO2纳米颗粒；

3）取150‑200 mL去离子水于容器中，加入8‑12 mL 1.5‑2.5%HAuCl4，在400‑800 r/min，

120‑140℃条件下搅拌20‑30 min，随后加入8‑12 mL、40‑60mg/mL柠檬酸钠水溶液，在120‑

140℃条件下继续搅拌 20min，然后停止加热，继续搅拌至Au 溶胶为室温；

4）量取30‑50 mg Fe3O4@SiO2于容器内，倒入50‑100mL无水乙醇超声清洗 1‑10min，重复，再水洗，随后加入30‑50 mL 2‑4%的聚二烯丙基二甲基氯化铵溶液，35‑45℃摇晃溶液至溶解，搅拌 15‑25 min，水洗4‑8次，得到 聚二烯丙基二甲基氯化铵修饰的 Fe3O4@SiO2；

5）超声条件下向150‑250 mL步骤3）所得 Au 溶胶中迅速加入 聚二烯丙基二甲基氯化铵修饰的 Fe3O4@SiO2，摇晃条件下将含溶液的容器放入摇床内，常温摇晃 20‑30min，水洗，得到Fe3O4@SiO2‑Au；

6）称量 0.8‑1.2gFe3O4@SiO2‑Au放入含有 80‑120mL无水乙醇的容器中，超声分散，待固体完全分散后加热至60‑80℃，缓慢内滴加25‑35ml 的APTEs，在N2条件下回流4‑8h；反应结束后离心得到固体，用无水乙醇洗涤后真空干燥得（H2N‑）Fe3O4@SiO2‑Au；

7）取450‑550mg（H2N‑）Fe3O4@SiO2‑Au，加入到100mL PBS缓冲液中，超声分散；加入180‑

220mL、20‑30%的戊二醛溶液，在30‑40℃的振荡水浴锅中振荡反应2‑3小时；磁性分离固液相，用PBS清洗3‑5遍，之后将活化所得磁珠分散在40‑60mL PBS缓冲液中，得到8‑12mg/mL的活化的（H2N‑）Fe3O4@SiO2‑Au；

8）取25‑35mL上述的活化的（H2N‑）Fe3O4@SiO2‑Au，向其中加入含有20‑55mg丝素蛋白单克隆抗体的BSA溶液，在30‑40℃下振荡反应1‑3h；

9）取丝素蛋白溶解在CB溶液中，加入步骤8）中结合抗体的（H2N‑）Fe3O4@SiO2‑Au，在在

30‑40℃条件下震荡孵育1‑3h；

10）混合均匀后滴在硅片上测试拉曼。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤1）中，2价Fe与3价Fe的摩尔比为1：1.5‑

2，反应溶液为100mL。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤2）中，无水乙醇，去离子水及氨水依次加入。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤3）中，涡流产生的颜色变化从淡黄色到红宝石色，得到Au 溶胶中纳米金颗粒粒径为15‑25nm。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤4）中，每100mL的聚二烯丙基二甲基氯化铵溶液包括：85‑95mL DI，5‑15 mL 1.5‑2.5%聚二烯丙基二甲基氯化铵初溶液，85‑90 mg,柠檬酸钠，10‑15mg NaCl；聚二烯丙基二甲基氯化铵溶液的用量为30‑50mL。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤7）中，所述PBS缓冲液的pH为7.4。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤8）中，所述CB溶液的pH=9.6。