1. 一种重组大肠杆菌,其特征在于,所述重组大肠杆菌表达了来源于Pogostemon cablin广藿香醇合酶突变体和来源于Escherichia coli的法尼基焦磷酸合成酶;所述法尼基焦磷酸合成酶的Gene ID为945064;所述广藿香醇合酶突变体是将GenBank:AY508730.1所示序列编码的广藿香醇合酶的第415位半胱氨酸突变为苯丙氨酸,或第415位半胱氨酸突变为苯丙氨酸的同时将第454位的组氨酸突变为丙氨酸获得的。
2. 根据权利要求1所述的重组大肠杆菌,其特征在于,在所述广藿香醇合酶突变体C端融合表达T7A标签,所述T7A标签的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。
3.根据权利要求2所述的重组大肠杆菌,其特征在于,法尼基焦磷酸合成酶与广藿香醇合酶突变体通过(PT)4P短肽融合表达。
4. 根据权利要求3所述的重组大肠杆菌,其特征在于,以代谢改造的菌株为底盘细胞,所述代谢改造的菌株沉默了乙酸合成代谢途径编码基因ackA‑pta、乳酸代谢途径编码基因ldhA、乙醇合成代谢途径编码基因adhE、琥珀酸合成代谢途径编码基因frdA的表达,表达了T7 RNA聚合酶编码基因T7RNAP,强化表达染色体上分泌代谢途径编码基因macAB、tolC、msbA、yadGH、lptAB,并强化表达NADPH辅酶循环代谢途径编码基因pntAB;
所述基因ackA‑pta中基因ackA的Gene ID为946775,基因pta 的Gene ID为946778;所述ldhA的Gene ID为946315;所述adhE的Gene ID为945837;所述frdA的Gene ID为948667;
所述T7 RNAP的Genbank登录号为M38308.1;所述macAB中基因macA的Gene ID为947322,基因macB的Gene ID为945164;所述tolC的Gene ID为947521;所述msbA的Gene ID为945530;
所述yadGH中基因yadG的Gene ID为944833,基因yadH的Gene ID为944836;所述lptAB中基因lptA的Gene ID为947920,基因lptB的Gene ID为947725;所述pntAB中基因pntA的Gene ID为946628,基因pntB的Gene ID为946144。
5.根据权利要求4所述的重组大肠杆菌,其特征在于,所述强化表达是通过T7启动子进行目的基因的表达。
6.一种生产广藿香醇的方法,其特征在于,利用权利要求1 5任一项所述重组大肠杆菌~
为发酵菌株,以葡萄糖、甘油、丙酮酸钠或含有丙酮酸钠的物质为底物,生产广藿香醇。
7. 根据权利要求6所述的方法,其特征在于,在菌株OD600为0.8~4或细胞干重达10 g/L时,用IPTG在20‑25℃下进行诱导,并添加十二烷萃取广藿香醇。
8. 根据权利要求7所述的方法,其特征在于,所述IPTG在体系中的浓度为0.2‑0.8 mM。
9.权利要求1 5任一项所述重组大肠杆菌在制备广藿香醇中的应用。
~