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专利号: 2021105176823
申请人: 浙江工业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-12-11
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种具有催化合成对甲砜基苯丝氨酸的活性和耐高温的L‑苏氨酸醛缩酶,其特征在于:氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。

2.一种编码如权利要求1所述L‑苏氨酸醛缩酶的多核苷酸,其特征在于,具有如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。

3.一种重组表达质粒载体,其特征在于:包含如权利要求2所述的多核苷酸。

4.一种重组大肠杆菌,其特征在于:包含如权利要求3所述的重组表达质粒载体。

5.如权利要求4所述的重组大肠杆菌的全细胞的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:

S1:将具有如SEQ ID NO:1所示核苷酸序列的目的基因克隆到载体pET‑28a的BamHI和HindIII的限制性酶切位点之间,构建重组表达质粒载体PsLTA‑pET‑28a;

S2:将S1中所述重组表达质粒载体PsLTA‑pET‑28a转化到大肠杆菌BL21感受态细胞中,培养得到重组菌E. coli BL21/PsLTA‑pET‑28a;

S3:收集S2中培养后的重组菌E. coli BL21/PsLTA‑pET‑28a,获得所述的重组大肠杆菌的全细胞。

6.如权利要求1所述的L‑苏氨酸醛缩酶在对甲砜基苯丝氨酸合成中的应用。

7.如权利要求6所述的应用,其特征在于,以包含有如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列的重组大肠杆菌的全细胞为催化剂,所述L‑苏氨酸醛缩酶为所述重组大肠杆菌的全细胞通过基因工程手段表达。

8.如权利要求7所述的应用,其特征在于,所述对甲砜基苯丝氨酸合成的反应体系包括:甘氨酸、对甲砜基苯甲醛、氯化钠、5'‑磷酸吡哆醛和所述的重组大肠杆菌的全细胞。

9.如权利要求8所述的应用,其特征在于,反应温度为20‑75℃,pH为7‑10,反应时间为

0.5‑3h。