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专利号: 2021105597324
申请人: 广西大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 有机化学〔2〕
更新日期:2023-12-11
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.水牛奶特征肽,其特征在于,所述水牛奶特征肽的氨基酸序列如SEQ ID NO1所示。

2.利用如权利要求1所述的水牛奶特征肽鉴定水牛奶的方法,其特征在于,包括以下步骤:

S1、在待测物中加入蛋白质沉淀剂,超声、离心,取上清液超滤,得到分子量小于10KDa的超滤液,对所述超滤液进行脱盐处理,得到脱盐溶液,对所述脱盐溶液进行液质分析,采集多肽指纹图谱;

S2、判断S1中的多肽指纹图谱是否含有水牛奶特征肽的离子信号:若含有水牛奶特征肽的离子信号,则说明待测物中含有水牛奶,若不含有水牛奶特征肽的离子信号,则说明待测物中不含有水牛奶。

3.如权利要求2所述的鉴定水牛奶的方法,其特征在于,还包括以下步骤:S3、若S1中的多肽指纹图谱含有水牛奶特征肽的离子信号,则测定待测物中水牛奶特征肽的峰面积,记为X;

S4、测定与待测物同重量份数的纯水牛奶中水牛奶特征肽的峰面积,记为Y,则待测物中含有的纯水牛奶比例为Y与X的比值。

4.如权利要求2所述的鉴定水牛奶的方法,其特征在于,S1中在待测物中加入蛋白质沉淀剂后超声的具体操作为:向待测物中加入酸性沉淀剂,调节pH至4.0后加入硫酸铵,得混合液,室温超声波萃取10min;其中,所述待测物与所述酸性沉淀剂的体积比为1:2,所述硫酸铵的浓度为1mol/L,所述酸性沉淀剂包括重量比为1:8:1的三氯乙酸、三氯甲烷、丙酮。

5.如权利要求2所述的鉴定水牛奶的方法,其特征在于,S1中超滤的具体操作为,将S1中的上清液转移至截留分子量为30KDa的超滤管内,10000g离心10min,得到一级超滤液;将所述一级超滤液转移至截留分子量为10KDa的超滤管内,10000g离心10min,得到分子量小于10KDa的超滤液。

6.如权利要求2所述的鉴定水牛奶的方法,其特征在于,S1中采用ZipTip C18脱盐柱进行脱盐处理。

7.如权利要求2所述的鉴定水牛奶的方法,其特征在于,S1中液质分析时采用的流动相A为:2%乙腈,0.1%甲酸,97.9%水;流动相B为:98%乙腈,0.1%甲酸,1.9%水;梯度洗脱条件:0~5min,流动相B为2%~12%;5~30min,流动相B为12%~20%;30~43min,流动相B为20%~32%;48~58min,流动相B为98%,体系流速300nL/min。