1.一种从牛蒡子提取共轭亚油酸的方法,其特征是,该方法包括以下步骤:
(1)采用锅具将牛蒡子在100~150℃下炒制5~10min;
(2)将炒制后的牛蒡子进行粉碎,粉碎后进行超声波提取,提取介质为乙醚,超声波条件为:超声频率为20~40kHz,功率为100~300W,温度30~50℃,超声时间为20~60min;超声波处理结束后,加入无水硫酸钠,过滤,滤液减压蒸馏回收乙醚,获得油状物质;
(3)将油状物质、吐温-80、猪胆酸钠和水按照质量比例1:0.2~0.3:0.001~0.003:1~2混合,进行均质反应,形成乳化反应体系;
(4)向乳化反应体系加入磷酸盐缓冲液和米根霉脂肪酶,进行酶解反应,获得酶解液;其中,酶解温度30~45℃,酶解时间为30~180min,pH为7.0~7.5,米根霉脂肪酶的用量为200~300U/mL乳化反应体系;
(5)将向步骤(4)中的酶解液加入保加利亚乳杆菌培养液进行共轭亚油酸转化,调节转化体系pH为4~6,转化温度为30~45℃,转化时间为20~24h,获得共轭亚油酸转化液;
(6)将尿素和乙醇混合,加入步骤(5)中的共轭亚油酸转化液,水浴回流30~60min,反应结束后冷却至室温;然后在2~4℃下放置18~24h,析出结晶,过滤,采用乙醚洗涤结晶,获得的滤液去除乙醚,加入无水硫酸钠脱水,即可获得高纯度的共轭亚油酸。
2.如权利要求1所述的方法,其特征是:步骤(2)中,超声波条件为:超声频率为35kHz,功率为150W,温度35℃,超声时间为30min。
3.如权利要求1所述的方法,其特征是:步骤(3)中,所述油状物质、吐温-80、猪胆酸钠和水的质量比例为1:0.25:0.002:1.5。
4.如权利要求1所述的方法,其特征是:步骤(3)中,采用均质机进行均质,均质条件为:均质压力为20~40MPa,均质温度为30~50℃,均质时间为5~15min。
5.如权利要求1所述的方法,其特征是:步骤(4)中,酶解反应温度为35℃,pH为7.4,酶用量为240U/mL乳化反应体系。
6.如权利要求1所述的方法,其特征是:步骤(5)中,保加利亚乳杆菌培养液是通过以下方法制备得到的:将保加利亚乳杆菌接种至MRS斜面培养基上,35~40℃培养24~48h后,接种至脱脂乳培养基中,35~40℃培养12~24h,获得种子液;向脱脂乳培养基中加入步骤(4)中的含有亚油酸的酶解液,接种种子液,35~40℃培养24~36h,获得保加利亚乳杆菌培养液。
7.如权利要求1所述的方法,其特征是:步骤(5)中,采用摇床培养转化,摇床转速为50~100rpm。
8.如权利要求1所述的方法,其特征是:步骤(5)中,酶解液与保加利亚乳杆菌培养液的体积比例为1:(1~3)。
9.如权利要求1所述的方法,其特征是:步骤(6)中,所述尿素、乙醇和步骤(5)中的共轭亚油酸转化液添加量比为1g:(3~7)mL:(0.2~0.5)g。