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专利号: 2021106463986
申请人: 浙江工业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-12-11
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种辣根过氧化物酶固定化方法,其特征在于所述方法包括以下步骤:(1)将甲基丙烯酰氧基丙基三甲氧基硅烷用质量分数为80%‑95%的乙醇水溶液稀释,调节pH至2‑3,加入粒径为20‑200μm的膨胀珍珠岩,浸泡0.5‑1h,所得混合液经过滤、洗涤、干燥,得到改性的膨胀珍珠岩的粉末;

(2)将辣根过氧化物酶悬浮于pH值为6.0‑8.0的磷酸盐缓冲溶液中,振荡混合30‑

60min,缓慢滴加甲基丙烯酸酐,所得反应液经离心、沉淀、冷冻干燥得甲基丙烯酰化的辣根过氧化物酶;所述甲基丙烯酸酐的体积以所述辣根过氧化物酶的质量计为0.1mL/mg‑

0.3mL/mg;

(3)将步骤(1)得到的改性膨胀珍珠岩与步骤(2)得到的甲基丙烯酰化的辣根过氧化物酶混合分散于质量分数为2%‑5%的丙烯酸水溶液中,加入光引发剂,搅拌均匀后在紫外光辐射,所得混合物经后处理,得到光固化水凝胶;所述光引发剂为2,2‑二甲氧基‑2‑苯基苯乙酮、2‑羟基‑4'‑(2‑羟乙氧基)‑2‑甲基苯丙酮、1‑羟基环己基苯基甲酮或2‑甲基‑1‑(4‑甲硫基苯基)‑2‑吗啉基‑1‑丙酮;所述甲基丙烯酰化的辣根过氧化物酶与改性的膨胀珍珠岩的质量比为1:10‑50;所述光引发剂与改性的膨胀珍珠岩的质量比为1:3‑7。

2.如权利要求1所述的辣根过氧化物酶固定化方法,其特征在于:步骤(1)中所述乙醇水溶液与甲基丙烯酰氧基丙基三甲氧基硅烷的体积比为1:0.02‑0.1。

3.如权利要求1所述的辣根过氧化物酶固定化方法,其特征在于:步骤(2)中所述磷酸盐缓冲溶液的体积以辣根过氧化物酶的质量计为0.5mL/mg。

4.如权利要求1所述的辣根过氧化物酶固定化方法,其特征在于:步骤(2)中所述磷酸盐缓冲溶液的pH为7.1。

5.如权利要求1所述的辣根过氧化物酶固定化方法,其特征在于:步骤(2)中所述甲基丙烯酸酐的体积以所述辣根过氧化物酶的质量计为0.2mL/mg。

6.如权利要求1所述的辣根过氧化物酶固定化方法,其特征在于:步骤(3)中所述的紫外光辐射功率为100‑250W,照射时间为5‑30min。

7.如权利要求6所述的辣根过氧化物酶固定化方法,其特征在于:步骤(3)中所述的紫外光辐射功率为120W,照射时间为16min。

8.如权利要求1所述的辣根过氧化物酶固定化方法,其特征在于:步骤(3)中所述光引发剂为2,2‑二甲氧基‑2‑苯基苯乙酮。

9.如权利要求1所述的辣根过氧化物酶固定化方法,其特征在于:步骤(3)中所述甲基丙烯酰化的辣根过氧化物酶与改性的膨胀珍珠岩的质量比为1:20‑25。

10.如权利要求1所述的辣根过氧化物酶固定化方法,其特征在于:步骤(3)中所述后处理为:将所述混合物用去离子水洗涤、干燥,得到所述光固化水凝胶。