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专利号: 2021106518071
申请人: 浙江工业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-12-11
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种菌酶联合降解聚对苯二甲酸乙二醇酯的方法,其特征在于所述方法为:以变栖克雷伯氏菌SY1(Klebsiella variicola SY1)经扩大培养获得的细胞悬液和南极假丝酵母角质酶为催化剂,以聚对苯二甲酸乙二醇酯为底物,以pH 7.0‑9.0的缓冲液为反应介质构成反应体系进行降解反应,降解反应过程中,底物和南极假丝酵母角质酶先加入缓冲液中,

60℃降解反应5天后,再加入变栖克雷伯氏菌SY1细胞悬液,30℃降解1天后升温至60℃继续降解5天,使聚对苯二甲酸乙二醇酯高聚物降解为单体化合物;所述变栖克雷伯氏菌SY1,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:M 2020198,保藏日期2020年6月10日,地址中国武汉,武汉大学,邮编430072。

2.如权利要求1所述的方法,其特征在于所述缓冲液为pH 8.0、50‑100mM Tris‑HCl缓冲液。

3.如权利要求1所述的方法,其特征在于所述聚对苯二甲酸乙二醇酯结晶度为10‑

30%。

4.如权利要求3所述的方法,其特征在于所述聚对苯二甲酸乙二醇酯为lcPET或boPET,其中lcPET为结晶度11.62%的塑料颗粒;boPET为结晶度26.49%的塑料膜。

5.如权利要求1所述的方法,其特征在于所述底物加入量以缓冲液体积计为1‑5mg/mL。

6.如权利要求1所述的方法,其特征在于所述南极假丝酵母角质酶为南极假丝酵母角质酶HiC,所述南极假丝酵母角质酶HiC加入量以蛋白含量计为10‑50μg/mL缓冲液。

7.如权利要求1所述的方法,其特征在于所述细胞悬液是将变栖克雷伯氏菌SY1接种至LB培养基,30℃培养1天至对数生长期,然后用PBS缓冲液洗涤三次,最后将菌体重悬于PBS9

缓冲液中,获得细胞悬液;所述缓冲液中细胞悬液加入量为2~8×10cfu/mL。