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专利号: 2021106568032
申请人: 奥锐特药业股份有限公司
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-12-11
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种烯酮还原酶突变体,其特征在于,其由氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示的野生型烯酮还原酶进行P296A突变获得,所述烯酮还原酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示。

2.编码如权利要求1中所述的烯酮还原酶突变体的基因。

3.如权利要求2所述的编码烯酮还原酶突变体的基因,其特征在于,其核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示。

4.一种重组质粒,其特征在于,所述重组质粒包含权利要求2‑3任一项所述的编码烯酮还原酶突变体的基因。

5.一种重组菌,其特征在于,所述重组菌包含权利要求2‑3任一项所述的编码烯酮还原酶突变体的基因。

6.权利要求1所述的烯酮还原酶突变体或权利要求2‑3任一项所述的基因在酶催化不对称还原4‑丙基‑2(5H)‑呋喃酮制备布瓦西坦中间体(R)‑4‑正丙基二氢呋喃‑2(5H)‑酮中的应用。

7.如权利要求6所述的应用,其特征在于,所述应用包括:构建含有所述编码烯酮还原酶突变体的基因的重组菌,以所述重组菌经发酵培养获得的菌体经破碎获得的含酶制剂为催化剂,对4‑丙基‑2(5H)‑呋喃酮进行不对称加氢反应,获得布瓦西坦中间体(R)‑4‑正丙基二氢呋喃‑2(5H)‑酮。

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8.如权利要求7所述的应用,其特征在于,所述不对称加氢反应是在NAD(P)/NAD(P)H辅酶循环系统协同作用下进行。

9.如权利要求8所述的应用,其特征在于,所述辅酶循环系统选自醇脱氢酶/异丙醇、甲酸脱氢酶/甲酸盐、葡萄糖脱氢酶/葡萄糖。