1.一种GH18几丁质酶ChiA,其特征在于,编码所述GH18几丁质酶ChiA的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。
2.一种包含权利要求1所述基因的重组载体。
3.根据权利要求2所述的重组载体,其特征在于,表达载体为pET32a(+),所述基因在表达载体pET‑32a(+)的多克隆位点间插入。
4.一种包含权利要求3所述的重组载体的基因工程菌。
5. 根据权利要求4所述的基因工程菌,其特征在于,宿主细胞为大肠杆菌E.coli BL21(DE3)。
6.权利要求1所述GH18几丁质酶ChiA在生产几丁寡糖中的应用。
7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,所述GH18几丁质酶ChiA以胶体几丁质为底物生产几丁寡糖。
8.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,包括:(1)将包含GH18几丁质酶的基因工程菌接入LB培养基中进行种子培养;
(2)种子液转入发酵培养基中进行发酵培养,之后加入诱导剂诱导酶类的表达;
(3)对发酵液进行离心,获取沉淀,通过超声破碎获得酶液;
(4)将酶液与中性胶体几丁质反应生产几丁寡糖。
+ +
9.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,还包括,所述(4)中,在酶液中添加Na、Li 、
2+ 2+
Mg 、Ca 中的一种或几种。
10.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,所述胶体几丁质的配制方法为:将片状几丁质粉碎过筛,称取粉末几丁质缓缓加入浓盐酸,迅速搅拌,待其全部溶解后用玻璃棉过滤去杂质,溶液加入蒸馏水,离心得到沉淀,用蒸馏水洗至中性。