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专利号: 2021106607003
申请人: 常熟理工学院
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2024-02-23
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种GH18几丁质酶ChiA,其特征在于,编码所述GH18几丁质酶ChiA的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。

2.一种包含权利要求1所述基因的重组载体。

3.根据权利要求2所述的重组载体,其特征在于,表达载体为pET32a(+),所述基因在表达载体pET‑32a(+)的多克隆位点间插入。

4.一种包含权利要求3所述的重组载体的基因工程菌。

5. 根据权利要求4所述的基因工程菌,其特征在于,宿主细胞为大肠杆菌E.coli BL21(DE3)。

6.权利要求1所述GH18几丁质酶ChiA在生产几丁寡糖中的应用。

7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,所述GH18几丁质酶ChiA以胶体几丁质为底物生产几丁寡糖。

8.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,包括:(1)将包含GH18几丁质酶的基因工程菌接入LB培养基中进行种子培养;

(2)种子液转入发酵培养基中进行发酵培养,之后加入诱导剂诱导酶类的表达;

(3)对发酵液进行离心,获取沉淀,通过超声破碎获得酶液;

(4)将酶液与中性胶体几丁质反应生产几丁寡糖。

+ +

9.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,还包括,所述(4)中,在酶液中添加Na、Li 、

2+ 2+

Mg 、Ca 中的一种或几种。

10.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,所述胶体几丁质的配制方法为:将片状几丁质粉碎过筛,称取粉末几丁质缓缓加入浓盐酸,迅速搅拌,待其全部溶解后用玻璃棉过滤去杂质,溶液加入蒸馏水,离心得到沉淀,用蒸馏水洗至中性。