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专利号: 2021106660772
申请人: 广西大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-12-11
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种重组毕赤酵母分泌表达左聚糖蔗糖酶的方法,其特征在于,将左聚糖蔗糖酶(Levansucrase)基因克隆到毕赤酵母整合质粒上,得到的重组质粒线性化后转化到宿主毕赤酵母,通过同源重组将左聚糖蔗糖酶(Levansucrase)基因整合到毕赤酵母染色体中,挑选出携带高拷贝外源基因的重组毕赤酵母菌株,即得。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述的左聚糖蔗糖酶基因来源于枯草芽孢杆菌。

3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述的毕赤酵母整合质粒为携带α‑MF信号肽的pPIC9K整合质粒,该质粒将α‑MF信号肽与外源基因同时整合到毕赤酵母染色体上。

4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述的宿主毕赤酵母为毕赤酵母GS115菌株。

5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述的线性化位点选择为Sac I。

6.根据权利要求1‑5任一权利要求所述的方法得到的重组毕赤酵母在生产左聚糖方面的应用。

7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于:所述重组毕赤酵母在生产左聚糖方面的应用操作方法为所得重组毕赤酵母经甲醇诱导培养,离心,上清液作为酶制剂,以蔗糖为底物,酶法合成高分子量的左聚糖。