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专利号: 2021108189312
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 测量;测试
更新日期:2023-10-10
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种制备DNA三通结‑银簇比率型荧光传感器的方法,其特征在于,包括如下过程:(1)DNA三通结的构建:利用氯霉素适配体、模板I链、模板II链进行相互杂交,然后在95℃下退火5min,结束后,冷却,获得DNA三通结;其中,氯霉素适配体的序列如SEQ ID NO.1所示;模板I链的序列如SEQ ID NO.2所示;模板II链的序列如SEQ ID NO.3所示;

(2)银簇的制备:将步骤(1)所得的DNA三通结分散在水中形成分散液,分散液与TAE/Mg 

2+

缓冲液、AgNO3水溶液混合,混匀形成混合液,避光放置;然后向混合液中加入NaBH4水溶液,混匀反应,反应结束后,即得DNA三通结‑银簇比率型荧光传感器。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,DNA三通结、NaBH4、AgNO3的摩尔比为1:20:

20。

3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(1)中,相互杂交时,控制氯霉素适配体、模板I链、模板II链的摩尔比为1:1:1。

4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(2)中,混匀后,DNA三通结的浓度为2.5μmol/L。

2+

5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(2)中,TAE/Mg  缓冲液的pH值为

2+

7.5;分散液与TAE/Mg  缓冲液的体积用量比为8.8:1。

6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,AgNO3水溶液的浓度为5mmol/L;NaBH4水溶液的浓度为5mmol/L。

7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(2)中,混匀后,AgNO3、NaBH4水溶液的浓度均为50μmol/L。

8.根据权利要求1‑7任一项所述的方法,其特征在于,所述步骤(2)中,混匀反应的时间为3h;温度为20℃。

9.权利要求1‑8任一项所述方法制备的一种DNA三通结‑银簇比率型荧光传感器。

10.一种氯霉素残留检测方法,其特征在于,包括以下过程:(a)将一系列已知氯霉素浓度的标准样品加入到含有权利要求9所述的DNA三通结‑银簇比率型荧光传感器的混合体系中、混匀反应,然后分别测得相应荧光强度F,以及氯霉素浓度为0时的荧光强度F0,并计算获得相对荧光强度IF=(F0‑F)/F0;利用相对荧光强度与氯霉素浓度进行线性关联,获得定量检测模型;

(b)待测样品溶液加入到含有DNA三通结‑银簇比率型荧光传感器的混合体系中,获得其相对荧光强度,然后通过步骤(a)所得定量检测模型,测得待测样品溶液中氯霉素含量。