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专利号: 2021108700007
申请人: 青岛科技大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2024-02-23
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.p53基因检测探针,其特征在于,由多孔中空的磁性纳米颗粒、封装在多孔中空的磁性纳米颗粒内部的电化学氧化还原活性探针、包覆在多孔中空的磁性纳米颗粒表面的阳离子聚合物功能层以及吸附在功能层表面的捕获DNA组成,其中,所述捕获DNA为p53基因的部分互补序列,序列为5'‑TCTTCCAGTGTGATG‑3'。

2.根据权利要求1所述的p53基因检测探针,其特征在于,所述多孔中空的磁性纳米颗粒选自Fe3O4、Fe(O)、MnFe2O4、CoFe2O4、NiFe2O4中任一种;

3‑

所述电化学氧化还原活性探针选自[Fe(CN)6] 、亲水性C60纳米材料、Fc中的任一种;

所述阳离子聚合物选自聚二烯丙基二甲基氯化铵、聚乙烯亚胺、聚乙烯胺、聚乙烯吡啶、聚磷酸盐、聚硅酸盐中的任一种。

3.根据权利要求1或2所述的p53基因检测探针的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:

将干燥的多孔中空的磁性纳米颗粒加入到阳离子聚合物溶液中,超声处理,得到均匀悬浮液;

对所得悬浮液进行磁分离,收集磁分离产物,得到包覆有阳离子聚合物的多孔中空的磁性纳米颗粒;

将包覆阳离子聚合物的多孔中空的磁性纳米颗粒与电化学氧化还原活性探针电化学氧化还原活性探针于温度22‑28℃、转数100‑120r混合6‑8h,然后加入置于Tris‑HCl缓冲液体系中的捕获DNA,于22‑28℃、转数100‑120r再混合6‑8h,得到磁性复合材料;

将所得磁性复合材料进行磁分离,洗涤干燥,得到p53基因检测探针。

4.用于p53基因检测的生物传感器,其特征在于,包含权利要求1或2所述的p53基因检测探针。

5.根据权利要求4所述的生物传感器,其特征在于,还包括修饰电极,所述修饰电极由

12‑硫醇修饰的金电极和富集在12‑硫醇表面的亚甲基蓝组成。

6.根据权利要求1或2所述的p53基因检测探针在检测p53基因中的应用。

7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,应用时,将p53基因检测探针加入待测样品和核酸外切酶中,于温度37±1℃下孵育、反应1.5‑2h检测电信号的变化情况,定量检测待测样品中p53基因的含量;

其中,所加入的p53基因检测探针、待测样品和核酸外切酶的体积比为5:5:0.5,所述核酸外切酶为ExoⅢ。

8.根据权利要求4或5所述的生物传感器在p53基因检测中的应用。

9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于,应用时,将p53基因检测探针加入待测样品和核酸外切酶中,于温度37±1℃下孵育、反应1.5‑2h;

通过磁力选择去除上述反应体系中的磁性纳米颗粒,并将修饰电极浸入到剩余的反应体系中,于温度37±1℃下利用电化学氧化还原活性探针与修饰电极表面的MB反应,检测电信号的变化情况,定量检测待测样品中p53基因的含量。

10.根据权利要求8所述的应用,其特征在于,所述p53基因为人血清中的p53基因。