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专利号: 2021108918505
申请人: 江西农业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 有机化学〔2〕
更新日期:2023-12-11
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.含猪流行性腹泻病毒nsp10蛋白的融合蛋白,其特征在于,所述融合蛋白由MBP蛋白和猪流行性腹泻病毒nsp10蛋白组成,所述猪流行性腹泻病毒nsp10蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示,MBP蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。

2.一种重组表达载体,其特征在于,所述重组表达载体中含有用于表达权利要求1中融合蛋白的核苷酸序列。

3.一种宿主细胞,其特征在于,所述宿主细胞中含有权利要求2所述的重组表达载体。

4.猪流行性腹泻病毒nsp10蛋白和权利要求1所述的融合蛋白在制备猪流行性腹泻病毒疫苗中的应用。

5.猪流行性腹泻病毒nsp10蛋白和权利要求1所述的融合蛋白在制备猪流行性腹泻病毒诊断试剂中的应用。

6.权利要求1中所述融合蛋白的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤1:提取猪流行性腹泻病毒RNA,反转录为nsp10cDNA;

步骤2:设计与合成猪流行性腹泻病毒的nsp10基因的引物,扩增猪流行性腹泻病毒的nsp10基因;

步骤3:将猪流行性腹泻病毒的nsp10基因与含有MBP基因的载体连接,鉴定后转化感受态细胞;

步骤4:重组蛋白MBP‑nsp10的表达,纯化,鉴定。

7.根据权利要求6所述的融合蛋白的制备方法,其特征在于,所述MBP‑nsp10蛋白最佳表达温度为16℃。

8.根据权利要求6所述的融合蛋白的制备方法,其特征在于,所述MBP‑nsp10蛋白最佳表达时间为24h。

9.根据权利要求6所述的融合蛋白的制备方法,其特征在于,所述MBP‑nsp10蛋白表达时最佳IPTG浓度为1.4mM。

10.根据权利要求4所述的所述的应用,其特征在于,猪流行性腹泻病毒nsp10蛋白的最佳表达温度为40℃、最佳表达时间为8h,表达时最佳IPTG浓度为1.4mM。