1.一种表皮干细胞向肝脏细胞分化的改进方法,其特征在于:包括以下步骤:
(1)表皮干细胞的预处理:将表皮干细胞转移到细胞培养液中进行培养,得到繁殖的表皮干细胞;
(2)表皮干细胞的分离处理:将步骤(1)中繁殖的表皮细胞进行二次培养,待表皮干细胞长至融合度为70%,以1:3进行传代,传至3代后,进行冷冻贮存;
(3)表皮干细胞的分化处理:将步骤(2)中冷冻的表皮干细胞与肝脏细胞进行混合,并配置成细胞悬液,随后置于诱导液中,直至完成分化过程;
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步骤(1)中培养后表皮干细胞的密度为1x10个/mL;
步骤(1)中细胞培养液的组分如下:Ham's F‑10培养基 14份,氯化钠 2份,
醋酸钾 0.7份;
其中培养温度为37℃、培养时间为7d、二氧化碳浓度为5%;
步骤(2)中二次培养的细胞培养液的组分如下:Ham's F‑10培养基 15份,海藻酸钠 2份,
氯化钙 0.6份;
其中培养温度为37℃、培养时间为7d、二氧化碳浓度为5%;
步骤(3)中表皮干细胞与肝脏细胞之间的数量比为1:0.5;
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步骤(3)中细胞悬液的密度为1x10个/mL;
步骤(3)中诱导液的组分如下:维生素C 60μg/L,β‑磷酸甘油钠 15mol/L,FBS 10%体积分数,IGF‑1 25μg/L,IGF‑2 20μg/L。