1.一种布鲁氏菌A19株特异性多肽作为抗原在制备布鲁氏菌A19抗体检测试剂盒中的应用,其特征在于,所述特异性多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。
2.一种ELISA检测试剂盒,其特征在于,包括权利要求1中所述的特异性多肽。
3.如权利要求2所述的ELISA检测试剂盒,其特征在于,还包括:包被权利要求1中所述的特异性多肽的酶标板、酶标抗体、封闭液、洗涤液、显色液、阴性对照和阳性对照。
4.如权利要求3所述的ELISA检测试剂盒,其特征在于,所述酶标抗体为HRP标记的兔抗牛IgG抗体。
5.一种布鲁氏菌A19株特异性多肽作为抗原构建的布鲁氏菌A19抗体的ELISA检测方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)以权利要求1中所述的特异性多肽包被酶标板,包被后用BSA封闭;
(2)待阴性血清和阳性血清稀释后与包被的特异性多肽进行孵育;
(3)洗涤后,加入HRP标记的兔抗牛二抗进行孵育;
(4)洗涤后,加入显色液显色反应,然后加入硫酸溶液终止反应,在450nm下测定OD值,以判定布鲁氏菌A19抗体的水平。
6.如权利要求5所述的ELISA检测方法,其特征在于,所述特异性多肽浓度为8‑15μg/ml。
7.如权利要求5所述的ELISA检测方法,其特征在于,步骤(1)中,包被条件为:4℃包被过夜;封闭条件为:0.5%BSA封闭30‑60min。
8.如权利要求5所述的ELISA检测方法,其特征在于,步骤(2)和步骤(3)中孵育时间均为20‑40min。
9.如权利要求5所述的ELISA检测方法,其特征在于,步骤(4)中,用TMB溶液避光显色
10‑20min。