1.双光子双比率型NADH、HClO、H2S三级响应近红外荧光分子探针,其结构式如式(1)所示:
2.根据权利要求1所述的双光子双比率型NADH、HClO、H2S三级响应近红外荧光分子探针的制备方法,包括步骤:
提供溶解有原料1和三氟甲烷磺酸甲酯的除氧溶剂;
反应后将反应液冷却,对结晶产物洗涤、干燥,即得所述荧光分子探针;
其中:所述原料1的结构式如式(2)所示:
3.根据权利要求2所述的荧光分子探针的制备方法,其特征在于,所述原料1和三氟甲烷磺酸甲酯的摩尔比范围为1:8‑1:4。
4.根据权利要求2所述的荧光分子探针的制备方法,其特征在于,所述除氧溶剂包括除氧氯仿、除氧DMF中的任一种。
5.根据权利要求2所述的荧光分子探针的制备方法,其特征在于,所述反应温度为20‑
30℃,时间为24‑28小时。
6.根据权利要求2所述的荧光分子探针的制备方法,其特征在于,采用0‑5℃的除氧溶剂洗涤所述结晶产物。
7.根据权利要求2所述的荧光分子探针的制备方法,其特征在于,所述原料1的合成包括步骤:
将原料2和3‑喹啉甲醛溶解于溶剂,将得到的混合液加热回流;
完成后反应液冷却结晶,将结晶产物洗涤、重结晶后干燥,得原料1;
其中:所述原料2的结构式如式(3)所示:
8.根据权利要求7所述的荧光分子探针的制备方法,其特征在于,所述原料1的合成中,原料2和3‑喹啉甲醛的摩尔比为1:1‑1:3。
9.根据权利要求7所述的荧光分子探针的制备方法,其特征在于,所述原料1的合成中,溶剂包括甲醇、乙醇中的至少一种。
10.根据权利要求7所述的荧光分子探针的制备方法,其特征在于,所述原料1的合成中,加热回流温度为50‑60℃,回流时间为12‑15小时。
11.根据权利要求7所述的荧光分子探针的制备方法,其特征在于,所述原料1的合成中,采用0‑2℃的甲醇对所述结晶产物进行洗涤,然后采用乙醇作为重结晶溶剂。
12.根据权利要求7所述的荧光分子探针的制备方法,其特征在于,所述原料2的合成包括步骤:
向溶有原料3的乙酸乙酯冷却液中加入溶有盐酸的乙酸乙酯;
将所得混合物加热回流,完成后的反应液冷却结晶;
将得到的结晶产物洗涤后纯化,即得原料2;
其中:所述原料3的结构式如式(4)所示:
13.根据权利要求12所述的荧光分子探针的制备方法,其特征在于,所述原料2的合成中,原料3和盐酸的摩尔比为1:0.05‑1:0.01。
14.根据权利要求12所述的荧光分子探针的制备方法,其特征在于,所述原料2的合成中,加热回流的反应温度为40‑50℃,时间为12‑15小时。
15.根据权利要求12所述的荧光分子探针的制备方法,其特征在于,所述原料2的合成中,采用0‑2℃的乙酸乙酯对所述结晶产物进行洗涤。
16.根据权利要求12所述的荧光分子探针的制备方法,其特征在于,所述原料2的合成中,采用二氯甲烷和甲醇洗脱的硅胶色谱法对固体产物进行纯化。
17.根据权利要求12所述的荧光分子探针的制备方法,其特征在于,所述原料3的合成包括步骤:
将原料4和丙二腈溶解于无水溶剂中,将得到的混合液加热回流;
完成后将反应液冷却结晶,将得到的结晶产物洗涤后干燥,对所得固体进行纯化,即得原料3;
其中:所述原料4的结构式如式(5)所示:
18.根据权利要求17所述的荧光分子探针的制备方法,其特征在于,所述原料3的合成中,原料4和丙二腈的物质的量之比为1:3‑1:5。
19.根据权利要求17所述的荧光分子探针的制备方法,其特征在于,所述原料3的合成中,加热回流反应温度为50‑60℃,时间为10‑12小时。
20.根据权利要求17所述的荧光分子探针的制备方法,其特征在于,所述原料3的合成中,采用0‑2℃的乙醇洗涤所述结晶产物。
21.根据权利要求17所述的荧光分子探针的制备方法,其特征在于,所述原料3的合成中,无水溶剂包括无水乙醇、无水甲醇、无水DMF中的至少一种。
22.根据权利要求17所述的荧光分子探针的制备方法,其特征在于,所述原料4的合成包括步骤:
将原料5和4‑甲酰苯硼酸溶于无水溶剂中,在隔氧环境下,加入催化剂,完成后继续加入四(三苯基膦)钯,并对所得混合液加热回流;
反应完成后先浓缩反应液;然后洗涤得到的浓缩液,再萃取浓缩液中的反应产物,将得到的萃取液干燥后浓缩,所得固体纯化后即得原料4;
其中:所述原料5的结构式如式(6)所示:所述式(6)中,X=F、Cl、Br、I元素中的任意一种。
23.根据权利要求22所述的荧光分子探针的制备方法,其特征在于,所述原料4的合成中,原料5、4‑甲酰苯硼酸、四(三苯基膦)钯的物质的量之比为0.8:1:0.1‑1:3:0.5。
24.根据权利要求22所述的荧光分子探针的制备方法,其特征在于,所述原料4的合成中,加热回流的温度为70‑80℃,时间控制在12小时以内。
25.根据权利要求22所述的荧光分子探针的制备方法,其特征在于,所述原料4的合成中,采用浓度>10.0mol/L的碳酸钠水溶液、碳酸钾水溶液、碳酸氢钠水溶液、碳酸氢钾水溶液中的至少一种作为催化剂,且回流时间<10h。
26.根据权利要求22所述的荧光分子探针的制备方法,其特征在于,所述原料4的合成中,采用0‑5℃饱和食盐水洗涤反应液;然后采用乙酸乙酯对浓缩液中的反应产物进行萃取,再采用无水硫酸钠对得到的萃取液进行干燥处理。
27.根据权利要求22所述的荧光分子探针的制备方法,其特征在于,所述原料4的合成中,无水溶剂包括无水甲苯和无水乙醇的混合液、无水甲苯和无水甲醇的混合液中的任一种。
28.根据权利要求22所述的荧光分子探针的制备方法,其特征在于,所述原料5的合成包括步骤:
将对‑卤素取代苯胺和二碳酸二叔丁酯溶于无水溶剂中,在隔氧环境下,将所得混合液加热回流;完成后将反应液冷却结晶,将得到的结晶产物洗涤后干燥,即得原料5。
29.根据权利要求28所述的荧光分子探针的制备方法,其特征在于,所述原料5的合成中,对‑卤素取代苯胺和二碳酸二叔丁酯的物质的量之比为0.9:1‑1:2。
30.根据权利要求28所述的荧光分子探针的制备方法,其特征在于,所述原料5的合成中,所述对‑卤素取代苯胺包括:对氟苯胺、对氯苯胺、对溴苯胺、对碘苯胺中的任一种。
31.根据权利要求28所述的荧光分子探针的制备方法,其特征在于,所述原料5的合成中,无水溶剂包括无水甲苯、无水DMF中的任一种。
32.根据权利要求28所述的荧光分子探针的制备方法,其特征在于,所述原料5的合成中,加热回流的温度为80‑90℃,回流时间为25‑30小时。
33.根据权利要求28所述的荧光分子探针的制备方法,其特征在于,所述原料5的合成中,将所述结晶产物溶于乙酸乙酯溶液中后,依次采用除氧后的盐酸和无氧饱和食盐水对该乙酸乙酯溶液进行洗涤;然后使用无水硫酸钠进行干燥处理。
34.根据权利要求28所述的荧光分子探针的制备方法,其特征在于,所述原料3、原料4的合成中,均采用石油醚和乙酸乙酯洗脱的硅胶色谱法对固体产物进行纯化。
35.根据权利要求28所述的荧光分子探针的制备方法,其特征在于,所述原料4、原料5的合成中,隔氧环境采用向反应容器中充入惰性气体或氮气保护气体的方式实现。
36.根据权利要求35所述的荧光分子探针的制备方法,其特征在于,所述惰性气体为氩气。
37.根据权利要求1所述的双光子双比率型NADH、HClO、H2S三级响应近红外荧光分子探针或者权利要求2‑36任一项所述的制备方法制备的荧光分子探针在分析化学、生物领域中的应用。