1.一种海藻酸盐凝胶包覆铜/锌磷酸盐晶体花固定化漆酶的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将海藻酸钠溶解在水中,获得海藻酸钠溶液;
(2)将硫酸铜和硫酸锌溶解在水中制得铜/锌硫酸盐混合溶液,再将铜/锌硫酸盐混合溶液与溶有漆酶的PBS缓冲液混合后结晶,制得铜/锌磷酸盐晶体花固定化漆酶;
(3)将PBS缓冲液与海藻酸钠溶液混合获得PBS/海藻酸钠混合溶液,然后将铜/锌磷酸盐晶体花固定化漆酶分散于PBS/海藻酸钠混合溶液中获得混合体系;再将混合体系逐滴滴入交联剂CaCl2溶液中交联,制得海藻酸盐凝胶包覆铜/锌磷酸盐晶体花固定化漆酶。
2.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(1)中海藻酸钠溶液的浓度为每
100mL水中加入3g海藻酸钠。
3.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(2)中铜/锌硫酸盐混合溶液由
0.5mol/L硫酸铜溶液和0.5mol/L硫酸锌溶液添加体积比为1~3∶1制得;
步骤(2)中铜/锌硫酸盐混合溶液加入体积比占溶有漆酶的PBS缓冲液的0.3%~
0.5%,其中,溶有漆酶的PBS缓冲液中漆酶浓度为0.2mg/mL。
4.如权利要求3所述的制备方法,其特征在于,步骤(2)中铜/锌硫酸盐混合溶液由
0.5mol/L硫酸铜溶液和0.5mol/L硫酸锌溶液添加体积比为1∶1制得;
步骤(2)中铜/锌硫酸盐混合溶液加入体积比占溶有漆酶的PBS缓冲液的0.4%。
5.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(3)中PBS缓冲液与海藻酸钠溶液混合的体积比为1∶0.25~4;
步骤(3)中铜/锌磷酸盐晶体花固定化漆酶分散到PBS/海藻酸钠混合溶液中的添加量为1.5~9mg/mL;
步骤(3)中交联剂CaCl2溶液的浓度为0.01~0.08g/mL。
6.如权利要求5所述的制备方法,其特征在于,步骤(3)中PBS缓冲液与海藻酸钠溶液混合的体积比为1∶0.5~1;
步骤(3)中铜/锌磷酸盐晶体花固定化漆酶分散到PBS/海藻酸钠混合溶液中的添加量为3~4.5mg/mL;
步骤(3)中交联剂CaCl2溶液的浓度为0.02~0.04g/mL。
7.如权利要求6所述的制备方法,其特征在于,步骤(3)中PBS缓冲液与海藻酸钠溶液混合的体积比为1∶0.5;
步骤(3)中铜/锌磷酸盐晶体花固定化漆酶分散到PBS/海藻酸钠混合溶液中的添加量为3mg/mL;
步骤(3)中交联剂CaCl2溶液的浓度为0.02g/mL。
8.如权利要求1~7任一所述制备方法制备的海藻酸盐凝胶包覆铜/锌磷酸盐晶体花固定化漆酶。
9.如权利要求8所述海藻酸盐凝胶包覆铜/锌磷酸盐晶体花固定化漆酶在降解双酚A中的应用。