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专利号: 2021113857179
申请人: 浙江工业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-12-11
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种假单胞菌zjut126在降解N‑月桂酰谷氨酸中的应用。

2.如权利要求1所述的应用,其特征在于所述应用为:以假单胞菌zjut126经发酵培养获得的湿菌体为催化剂,以N‑月桂酰谷氨酸为底物,以pH7.0‑9.0的50mM Tris‑HCl缓冲液为反应介质构成反应体系,在35~40℃、150~200r/min条件下进行反应,实现对N‑月桂酰谷氨酸的降解。

3.如权利要求1所述的应用,其特征在于所述反应体系中,催化剂用量以湿菌体重量计为3‑15g/L,所述底物加入量为3‑15g/L。

4.如权利要求1所述的应用,其特征在于所述湿菌体的制备方法为:(1)斜面培养

将假单胞菌zjut126接种至斜面培养基,30℃培养2天,获得斜面菌体;所述斜面培养基组成为:K2HPO4·3H2O 2.1g/L,KH2PO4 0.4g/L,NaCl 0.1g/L,MgSO4·7H2O 0.2g/L,CaCl2 

0.025g/L,NH4NO3 0.5g/L、N‑月桂酰谷氨酸1.0g/L,琼脂20g/L,溶剂为水,pH值自然;

(2)种子培养

将步骤(1)制备的斜面菌体接种至种子培养基,30℃培养24h,获得种子液;所述种子培养基组成为:NaCl 0.5g/L,KH2PO4 0.4g/L,K2HPO4 1.6g/L,NH4Cl 1.0g/L,MgSO4·7H2O 

0.2g/L,CaCl2 0.03g/L,N‑月桂酰谷氨酸1.0g/L,微量元素液10mL/L,用NaOH调节pH值为

8.0,溶剂为去离子水;微量元素液组成:CoCl2 0.1g/L,MnSO4 0.5g/L,FeSO4·7H2O 0.1g/L,CuSO4 0.1g/L,ZnSO4·7H2O 0.1g/L,H3BO3 0.01g/L,Al(SO4)2·12H2O 0.01g/L,Na2MoO4·2H2O0.01g/L,EDTA·2Na 1g/L,溶剂为去离子水;

(3)发酵培养

将步骤(2)制备的种子液以体积浓度10%的接种量接种于发酵培养基,30℃、180rpm培养48h,离心,倒掉上清液,将湿菌体用pH 8.0、50mM Tris‑Hcl缓冲液洗涤1‑3次,获得湿菌体;所述发酵培养基组成为:NaCl 0.5g/L,MgSO4·7H2O0.2g/L,K2HPO4 1.6g/L,KH2PO4 

0.4g/L,NH4Cl 5.0g/L,微量元素液10mL/L,N‑月桂酰谷氨酸5.0g/L,溶剂为去离子水,用NaOH调节pH值为8;微量元素液组成:CoCl2 0.1g/L,MnSO4 0.5g/L,FeSO4·7H2O 0.1g/L,CuSO4 0.1g/L,ZnSO4·7H2O 0.1g/L,H3BO3 0.01g/L,Al(SO4)2·12H2O 0.01g/L,Na2MoO4·

2H2O0.01g/L,EDTA·2Na 1g/L,溶剂为去离子水。