1.一种线粒体靶向的荧光探针，其特征在于：所述荧光探针为紫色固体，化学结构式如式Ⅰ所示：

式I中，R为胆固醇甲酰氯或棕榈酰氯。

2.根据权利要求1所述的线粒体靶向的荧光探针，其特征是：所述胆固醇甲酰氯和棕榈酰氯结构式分别为，所述荧光探针为式I‑1或I‑2所示化合物中的一种，所述式I‑1简称为Cy1321，所述式I‑2简称为Cy972

3.根据权利要求1‑2任一项所述的线粒体靶向的荧光探针的合成方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)将酰氯类化合物用恒压滴压漏斗滴入F496中，加入三乙胺，冰浴滴加，常温反应，(2)反应结束后，将反应液用旋转蒸发仪旋干，即得固体产物。

4.根据权利要求3所述的线粒体靶向的荧光探针的合成方法，其特征是：所述F496为(E)‑2‑(2‑(2,3,4,5,6,7,8,9,13,14‑十氢‑12H‑1,10‑乙基苯并[k][1,4,7,10]四氮杂环十三碳烯‑15‑基)乙烯基)‑1,1,3‑三甲基‑1H‑苯并[e]吲哚‑3‑鎓，结构式如下Ⅱ所示：

5.根据权利要求3所述的线粒体靶向的荧光探针的合成方法，其特征在于：所述胆固醇甲酰氯或棕榈酰氯，以及F496分别溶解于二氯甲烷后，再将两种原料进行滴加反应。

6.根据权利要求3所述的线粒体靶向的荧光探针的合成方法，其特征在于：所述胆固醇甲酰氯与F496的摩尔比为9:1～10:1，所述三乙胺的加入比例为胆固醇甲酰氯摩尔量的1.3～1.5倍，所述反应的温度为25～28℃，反应时间为6.5～7h，滴加时间为30～40min。

7.根据权利要求3所述的线粒体靶向的荧光探针的合成方法，其特征在于：所述棕榈酰氯与F496的摩尔比为16:1～17:1，所述三乙胺的加入比例为棕榈酰氯摩尔量的1.0～1.2倍，所述反应的温度为25～28℃，反应时间为4.5～5h，滴加时间为10～20min。

8.根据权利要求3所述的线粒体靶向的荧光探针的合成方法，其特征在于：步骤(2)中，还包括对所述产物进行纯化，

所述固体产物为粗产物，以二氯甲烷与甲醇的体积比为200:1～15:1通过硅胶柱色谱提纯。

9.一种根据权利要求1‑8任一项所述的线粒体靶向的荧光探针的应用，其特征在于：所述荧光探针用于活细胞内线粒体荧光显微成像，用于体外极性检测细胞变化。

10.根据权利要求9所述的线粒体靶向的荧光探针合成方法的应用，其特征在于，所述荧光探针与商用细胞器探针对海拉细胞进行共定位检测，步骤包括：(1)配制：荧光探针浓度为1mM的二甲基亚砜溶液，即测试培养液；线粒体荧光探针浓度为200μM的二甲基亚砜溶液；细胞核荧光染料浓度为1mg/mL的超纯水溶液；溶酶体荧光探针浓度为50nM的培养基溶液，即Lyso‑Tracker Red工作液，(2)细胞培养：将复苏好的海拉细胞进行培养，培养基包含10％牛胚胎血清、1％双抗、

89％DMEM、在37℃，5％CO2的环境中培养24h，得到长势良好的细胞；将上述培养基中培育

24h的海拉细胞置入六孔板中，用包含10％牛胚胎血清、1％双抗、89％DMEM的培养基、在37

5 5

℃，5％CO2的环境中继续培养24h，每孔接种量为2×10～8×10孔/mL，备用；

(3)将六孔板中培育24h的海拉细胞分为ABC三组，其中：A组海拉细胞加入2μM的所述测试培养液和200nM的所述线粒体荧光探针共孵育20min；B组海拉细胞使用2μM的所述测试培养液和10μg/mL的所述细胞核荧光染料共孵育20min；C组海拉细胞使用2μM的所述测试培养液和50nM的所述溶酶体荧光探针分别孵育20min，(4)培养20min后，弃掉培养基，用3mL pH＝7.4的PBS缓冲液淋洗细胞3次，最后在六孔板中加入3mL pH＝7.4的PBS缓冲液,进行荧光成像，探针为红色通道，激发波长488nm，收集波段630‑754nm；线粒体探针为绿色通道，激发波长546nm,收集波段550‑630nm；细胞核探针为蓝色通道，激发波长405nm,收集波段400‑500nm；溶酶体探针为绿色通道，激发波长

546nm,收集波段550‑630nm，(5)对所述A、B、C组海拉细胞进行共聚焦激光荧光成像，得到三组细胞的共聚焦图谱，通过市售线粒体、细胞核和溶酶体探针标记细胞器，考察荧光探针的靶向分布特性。