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专利号: 2021114513154
申请人: 浙江海洋大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 有机化学〔2〕
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种厚壳贻贝抗氧化活性肽H5,其特征在于所述抗氧化活性肽H5的氨基酸系列为Gln‑Glu‑Thr‑Tyr,ESI‑MS测定其分子量为539.54Da。

2.如权利要求1所述厚壳贻贝抗氧化活性肽H5的制备,其特征在于包括以下步骤:

1)厚壳贻贝样品预处理:

将冷冻的厚壳贻贝室温流水解冻,低温烘干表面水分,解剖绞碎,加乙酸乙酯浸泡48h,脱脂过程中不断搅拌;脱脂后的样品经真空抽滤去除乙酸乙酯(旋蒸回收)后,烘干,粉碎;

2)酶解:

称取适量预处理过的厚壳贻贝体壁粉末,以1:30的料液比加入去离子水,4%的加中性蛋白酶酶解,酶解4h,用0.5mol/L NaOH和0.1mol/L HCL溶液调节pH中性蛋白酶(45℃、pH为

7.0)进行酶解;

3)采用加热灭酶法,在100℃的水浴中对酶解液进行灭活。灭酶结束后,冷却至室温,

8000r/min离心10min,收集上清,冻干,以备检测酶解液的ACE抑制活性;

4)分离纯化酶解肽中的活性肽:以DPPH等自由基清除率为评价指标,先采用超滤技术对多肽进行分级分离,随后采用QFF离子交换层析、Sephadex G‑15凝胶过滤层析、高效液相色谱法对其进一步分离,筛选出抗氧化能力最高的分离组分进行分离纯化,得厚壳贻贝抗氧化肽H5 Gln‑Glu‑Thr‑Tyr及H1 Tyr‑Glu‑Leu‑His‑Asp。

3.如权利要求2所述厚壳贻贝抗氧化活性肽H5的制备,其特征在于所述步骤1)中的乙酸乙酯的添加量为解剖绞碎后厚壳贻贝体重量的5倍。

4.如权利要求2所述厚壳贻贝抗氧化活性肽H5的制备,其特征在于所述步骤2)中厚壳贻贝体壁粉末与去离子水的比例为1:30。

5.如权利要求2所述厚壳贻贝抗氧化活性肽H5的制备,其特征在于所述步骤2)中的酶解温度45℃,酶解时间4h,添加酶量为4%。

6.如权利要求1所述厚壳贻贝抗氧化活性肽H5在为高血压、冠心病、脑血栓、心肌梗死、动脉粥样硬化、心力衰竭等心脑血管疾病的预防和治疗提供候选药物的应用。