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专利号: 2021115566638
申请人: 华南农业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 一般的物理或化学的方法或装置
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种用于检测那非类物质的系统,其特征在于,包含固相萃取微流控芯片、荧光免疫探针和免疫层析试纸条;

所述固相萃取微流控芯片包括第一层基片及设置在第一层基片上的过滤区(1)、用于装设固相萃取填料的固相萃取区(2)和用于蒸发溶剂的溶剂蒸发区(3),其中过滤区(1)设有过滤装置(101);所述过滤装置(101)由微柱阵列组成,所述过滤装置(101)的一端设有过滤装置进样口(102)、另一端设有过滤装置出样口(103),所述过滤装置的微柱的直径和相邻微柱之间的间隔由250μm~100μm从过滤装置进样口(102)到过滤装置出样口(103)的方向依次递减;所述固相萃取区(2)设有填料槽(201),填料槽(201)的一端设有填料槽进样口(202)、另一端设有填料槽出样口(203);所述溶剂蒸发区(3)设有用于蒸发溶剂的蒸发池(301)、用于蒸气流通的通气孔(302)、用于收集蒸气的储气容器(303);所述储气容器(303)设置于蒸发池(301)的顶端;所述通气孔(302)设置于蒸发池(301)和储气容器(303)之间;

所述蒸发池(301)的一端设有蒸发溶剂进样口(304)、另一端设有蒸发溶剂出样口(305);

所述荧光免疫探针的制备方法为:介孔硅球耦联荧光素即得到荧光介孔硅球;将荧光介孔硅球与那非类物质的抗体充分混合均匀;离心;封闭,即得到荧光免疫探针;所述荧光介孔硅球的制备方法包括以下步骤:将介孔硅球置于无水乙醇中,分散;离心取上清;洗涤;

加入荧光素搅拌充分;洗涤;加入多巴胺溶液,充分搅拌;洗涤;

所述免疫层析试纸条包括相连接的底板(10)、样品垫(11)、基膜(12)和吸水垫(13);所述基膜上设置标准线C线(14)和若干测试线T线(15);所述C线(1501)上包被二抗;所述T线(15)上分别包被不同的那非类物质的抗原;

用固相萃取微流控芯片对检测的样品进行前处理;将荧光免疫探针与前处理后的样品混合,得到混合液;将混合液置于免疫层析试纸条的样品垫(11)。

2.根据权利要求1所述的系统,其特征在于,所述固相萃取微流控芯片中,第一层基片上还设有第二层基片及第三层基片,第二层基片设置在第一层基片的顶面,第三层基片设置在第二层基片的顶面;

固相萃取区(2)和蒸发池(301)设置在第一层基片上;过滤区(1)和通气孔(302)设置在第二层基片上;储气容器(303)设置在第三层基片上;

所述蒸发溶剂出样口(305)包括第一蒸发溶剂出样口(3051)及第二蒸发溶剂出样口(3052);所述第一蒸发溶剂出样口(3051)设置于第一层基片,第二蒸发溶剂出样口(3052)设置于第二层基片;

填料槽进样口(202)、填料槽(201)、填料槽出样口(203)、蒸发溶剂进样口(304)、蒸发池(301)和第二蒸发溶剂出样口(3052)通过设置于第一层基片的第一微流管道(4)连接;

过滤装置进样口(102)、过滤装置(101)和过滤装置出样口(103)通过设置于第二层基片的第二微流管道(5)连接。

3.根据权利要求2所述的系统,其特征在于,所述固相萃取微流控芯片中,储气容器(303)装载有活性炭。

4.根据权利要求2所述的系统,其特征在于,所述固相萃取微流控芯片中,填料槽(201)装载有固相萃取的填料。

5.根据权利要求1所述的系统,其特征在于,所述固相萃取微流控芯片中,所述微柱的直径按照250μm、200μm、150μm和100μm的梯度依次递减,相邻微柱之间的间隔按照250μm、

200μm、150μm和100μm的梯度依次递减。

6.根据权利要求5所述的系统,其特征在于,还包含有用于加热蒸发池(301)中的液体的加热装置。

7.一种那非类物质的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:

S1.使用权利要求1~6任一所述的系统,其中填料槽(201)装有活化的固相萃取的填料;

S2.将待测样品的标准品注入固相萃取微流控芯片;待标准品流尽后,将洗脱液注入固相萃取微流控芯片,并加热;待洗脱液流尽后,将复溶液注入固相萃取微流控芯片,收集从芯片流出的液体,即为样品的萃取液;将萃取液与荧光免疫探针混匀,得到混合液;将免疫层析试纸条放入混合液中充分反应;待反应结束后,取出免疫层析试纸条检测荧光强度;

所述洗脱液为甲醇溶液;所述复溶液为PB溶液;

S3.根据标准品的浓度和步骤S2测得的荧光强度,绘制浓度与荧光强度的标准曲线;

S4.将标准品替换为待测样品,重复步骤S2,测得样品的荧光强度,利用步骤S3绘制的标准曲线计算得到样品中那非类物质的浓度。

8.根据权利要求7所述的检测方法,其特征在于,步骤S2中,所述甲醇溶液还含有0.1%乙酸(v/v)。

9.根据权利要求7所述的检测方法,其特征在于,步骤S2中,所述加热的温度为60℃~

65℃。

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