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专利号: 2021115670792
申请人: 赣南师范大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-12-11
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种增强黄色荧光蛋白标记的柑橘黄单胞杆菌,其特征在于,将增强黄色荧光蛋白基因eYFP转化至柑橘黄单胞杆菌中,获得Xcc‑eYFP菌株。

2.根据权利要求1所述增强黄色荧光蛋白标记的柑橘黄单胞杆菌,其特征在于,将增强黄色荧光蛋白基因eYFP克隆到广宿主蛋白表达或克隆载体质粒中,构建重组质粒;将重组质粒转入大肠杆菌感受态细胞,然后在含抗生素的LB培养基上培养筛选,再将从大肠杆菌转化子中提取的质粒DNA重新导入柑橘黄单胞杆菌中,获得Xcc‑eYFP菌株。

3.根据权利要求1或2所述增强黄色荧光蛋白标记的柑橘黄单胞杆菌,其特征在于,是将eYFP编码区转化至柑橘黄单胞杆菌中,所述eYFP编码区的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

4.根据权利要求1或2所述增强黄色荧光蛋白标记的柑橘黄单胞杆菌,其特征在于,所述柑橘黄单胞杆菌为亚洲致病性柑橘黄单胞杆菌。

5.根据权利要求2所述增强黄色荧光蛋白标记的柑橘黄单胞杆菌,其特征在于,所述广宿主蛋白表达或克隆载体质粒为pBBR1‑MCS5,重组质粒为pBBR1‑eYFP。

6.权利要求1~5任一所述转增强黄色荧光蛋白的柑橘黄单胞杆菌在快速评估柑橘品种对溃疡病抗性或在制备快速评估柑橘品种对溃疡病抗性的试剂盒中的应用。

7.一种快速评估柑橘品种对溃疡病抗性的方法,其特征在于,将增强黄色荧光蛋白标记的柑橘黄单胞杆菌Xcc‑eYFP的悬浮液接种于待评估的柑橘品种叶片上,培养,研磨,研磨液在荧光显微镜下观察荧光斑,进行荧光光斑计数。

8.根据权利要求7所述快速评估柑橘品种对溃疡病抗性的方法,其特征在于,所述培养条件为将接种Xcc‑eYFP的叶片置于28℃、湿度为60%、光照时间为12h的培养箱中察并记录发病情况。

9.一种用于快速评估柑橘品种对溃疡病抗性的试剂盒,其特征在于,含有权利要求1~

5任一所述转增强黄色荧光蛋白的柑橘黄单胞杆菌。

10.增强黄色荧光蛋白在制备不影响柑橘黄单胞杆菌生长、致病性的转基因柑橘黄单胞杆菌中的应用。