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专利号: 2022100065814
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-10-10
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1. 一种马来酸顺反异构酶突变体,其特征在于,以氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示的序列为亲本序列,将第96位的谷氨酰胺取代谷氨酸,将第100的丙氨酸取代为甲硫氨酸。

2.编码权利要求1所述的马来酸顺反异构酶突变体的基因。

3.含有权利要求2所述基因的载体。

4.表达权利要求1所述马来酸顺反异构酶突变体或含有权利要求2所述基因的微生物细胞。

5.根据权利要求4所述的微生物细胞,其特征在于,以大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、毕赤酵母为宿主细胞。

6.一种生产天冬氨酸的方法,其特征在于,利用表达权利要求1所述来酸顺反异构酶突变体以及天冬氨酸酶AspA的微生物细胞转化马来酸生成L‑天冬氨酸。

7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,将所述微生物细胞在培养体系中培养至OD600为0.6~0.8,加入诱导剂诱导14~16h,收集菌体;将菌体添加至以马来酸为底物的反应体系中反应4 12h。

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8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,所述反应体系中底物浓度为3.0 4.0M,菌~株OD600=5±0.5,在pH8±1、37~45℃下反应。

9.权利要求1所述来酸顺反异构酶突变体,或权利要求4或5所述微生物细胞在生产L‑天冬氨酸产品中的应用。