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专利号: 2022100532205
申请人: 广西大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 医学或兽医学;卫生学
更新日期:2023-12-11
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种可诱导肿瘤相关巨噬细胞M1型极化的光敏纳米胶束的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:

(1)将聚乙二醇溶于四氢呋喃中,得到mPEG‑NH2溶液;然后将Lys(Z)‑NCA溶于N,N‑二甲基甲酰胺中,得到Lys(Z)‑NCA溶液;再在保护性气体氛围下将mPEG‑NH2溶液加入到Lys(Z)‑NCA溶液中,于25~40℃条件下搅拌反应,待反应结束后将所得产物加入到冰乙醚中使其沉淀下来,过滤、真空干燥,得到mPEG‑PLL(Z);

(2)在0℃条件下,将含氯甲酸4‑硝基苯酯的二氯甲烷溶液加入到含吡啶的二氯甲烷溶液中,然后加入含步骤(1)中得到的mPEG‑PLL(Z)的二氯甲烷溶液,搅拌均匀,再在保护性气体氛围下搅拌反应,待反应结束后将所得产物加入到冰乙醚中使其沉淀下来,过滤、减压干燥,得到活化的mPEG‑PLL(Z);

(3)将步骤(2)中得到的活化的mPEG‑PLL(Z)、三乙胺和聚精氨酸加入到N,N‑二甲基甲酰胺中,在保护性气体氛围下进行反应,待反应结束后将所得产物加入到冰乙醚中使其沉淀下来,过滤、真空干燥,得到聚合物mPEG‑PLL(Z)‑PArg;

(4)在保护性气体氛围下,将步骤(3)中得到的聚合物mPEG‑PLL(Z)‑PArg溶解到三氟乙酸中,然后滴加含HBr的乙酸溶液进行反应,待反应结束后透析、冷冻干燥,得到mPEG‑PLL‑PArg;

(5)将光敏剂溶于二甲基亚砜中,然后加入N‑羟基琥珀酰亚胺、1‑(3‑二甲氨基丙基)‑

3‑乙基碳二亚胺盐酸盐和步骤(4)中得到的mPEG‑PLL‑PArg,搅拌反应,待反应结束后透析、冷冻干燥,得到链接光敏剂的嵌段聚合物,即所述的可诱导肿瘤相关巨噬细胞M1型极化的光敏纳米胶束。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(1)中所述的聚乙二醇的分子量为2000;

步骤(3)中所述的聚精氨酸的聚合度为10~30;

步骤(5)中所述的光敏剂为二氢卟吩e6。

3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(1)中所述的聚乙二醇与Lys(Z)‑NCA的摩尔比为1:20~40;

步骤(2)中所述的氯甲酸4‑硝基苯酯、吡啶和mPEG‑PLL(Z)的摩尔比为3:5:1;

步骤(3)中所述的活化的mPEG‑PLL(Z)、三乙胺和聚精氨酸的摩尔比为1:4:1;

步骤(5)中所述的光敏剂与N‑羟基琥珀酰亚胺、1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐和mPEG‑PLL‑PArg的摩尔比为1.1:1.3:1.3:1。

4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:在步骤(5)之后还包括如下步骤:(6)将链接光敏剂的嵌段聚合物与免疫激动剂溶解二甲基亚砜中,通过微量注射泵注射到水中,得到搭载免疫激动剂的纳米胶束,即所述的可诱导肿瘤相关巨噬细胞M1型极化的光敏纳米胶束。

5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于:步骤(6)中所述的免疫激动剂为非特异性免疫激活剂和特异性免疫激活剂;

步骤(6)中所述的mPEG‑PLL(‑Ce6)‑PArg与免疫激动剂的质量比为0~2:1,不包括0。

6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于:步骤(6)中所述的免疫激动剂为Resiquimod(R848);

步骤(6)中所述的mPEG‑PLL(‑Ce6)‑PArg与免疫激动剂的质量比为1~2:1。

7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(1)(2)(3)和(4)中所述的保护性气体为氩气或氮气中的至少一种;

步骤(4)中所述的三氟乙酸的用量为按每克mPEG‑PLL(Z)‑PArg配比8~9mL三氟乙酸计算;

步骤(4)中所述的含HBr的乙酸溶液的浓度为质量体积比33%;

步骤(4)中所述的含HBr的乙酸溶液与N,N‑二甲基甲酰胺的体积比为0.1:1;

步骤(4)中所述的透析为采用截留分子量2000~7000Da的透析袋进行透析;

步骤(4)和(5)中所述的透析所用的透析液为去离子水;

步骤(5)中所述的透析为采用截留分子量8000~12000Da的透析袋进行透析。

8.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(1)中所述的搅拌反应的时间为35℃;

步骤(1)中所述的搅拌反应的时间为3天以上;

步骤(2)中所述的搅拌均匀的时间为30分钟以上;

步骤(2)中所述的搅拌反应的时间为2天以上;

步骤(3)中所述的反应的时间为2天以上;

步骤(4)中所述的反应的时间为2小时以上;

步骤(5)中所述的反应的时间为1天以上。

9.一种可诱导肿瘤相关巨噬细胞M1型极化的光敏纳米胶束,其特征在于:通过权利要求1~8任一项所述的方法制备得到。

10.权利要求9所述的可诱导肿瘤相关巨噬细胞M1型极化的光敏纳米胶束在制备抗肿瘤药物中的应用。