1.一种从光炭轮菌属真菌中提取色酮、萘酚类化合物的方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)真菌培养:将真菌接种在大米培养基上,于室温培养30±2天;
2)粗浸膏的制备:将步骤1)所得产物置于甲醇中室温浸泡提取,减压浓缩,获得粗浸膏;
3)乙酸乙酯部位浸膏的制备:粗浸膏水溶后,用乙酸乙酯萃取,减压浓缩,获得乙酸乙酯部位浸膏;
4)硅胶柱层析:乙酸乙酯部位浸膏用硅胶柱拌样,依次用体积浓度为0%,10%,20%,30%,
40%,50%,60%,70%,80%的石油醚‑乙酸乙酯进行梯度洗脱,分别收集10%石油醚‑乙酸乙酯洗脱部分、20%石油醚‑乙酸乙酯洗脱部分;
5)10%石油醚‑乙酸乙酯洗脱部分用硅胶拌样后装柱,分别用体积比20:1、14:1的石油醚‑乙酸乙酯进行洗脱,薄层色谱检测,合并相同组分并减压回收溶剂,分别获得(2R)5‑羟基‑8‑甲氧基‑2‑甲基‑4H‑1‑苯并吡喃‑4‑酮粗品1、5,8‑羟基‑2甲基‑4H‑1‑苯并吡喃环‑4‑酮粗品2;
6)20%石油醚‑乙酸乙酯洗脱部分用硅胶拌样后装柱,用体积比4.5:1的石油醚‑乙酸乙酯进行洗脱,薄层色谱检测合并,得到3个组分,按照所得组分极性由小到大依次标记为组分1至3;组分1即为(4S) 4,5‑二羟基‑3,4‑二氢‑1(2H)‑酮粗品。
2.如权利要求1所述从光炭轮菌属真菌中提取色酮、萘酚类化合物的方法,其特征在于, 步骤1)中,所述大米培养基由80g大米与50‑80ml质量浓度0.3%的盐水混合组成。
3.如权利要求1所述从光炭轮菌属真菌中提取色酮、萘酚类化合物的方法,其特征在于, 步骤2)中,步骤1)所得产物置于甲醇中室温浸泡提取2‑4次,每次2‑4天。
4.如权利要求1所述从光炭轮菌属真菌中提取色酮、萘酚类化合物的方法,其特征在于,步骤5)中,(2R)5‑羟基‑8‑甲氧基‑2‑甲基‑4H‑1‑苯并吡喃‑4‑酮粗品1经Sephadex LH‑
20凝胶色谱柱纯化,用体积比1:1的二氯甲烷‑甲醇洗脱,薄层色谱检测,合并相同组分并减压回收溶剂;然后经硅胶拌样后装柱,用体积比15:1的石油醚‑乙酸乙酯洗脱,薄层色谱检测,合并相同组分并减压回收溶剂,即得(2R)5‑羟基‑8‑甲氧基‑2‑甲基‑4H‑1‑苯并吡喃‑4‑酮纯品。
5.如权利要求1所述从光炭轮菌属真菌中提取色酮、萘酚类化合物的方法,其特征在于,步骤5)中,5,8‑羟基‑2甲基‑4H‑1‑苯并吡喃环‑4‑酮粗品2经Sephadex LH‑20凝胶色谱柱纯化,用体积比1:1的二氯甲烷‑甲醇洗脱,薄层色谱检测,合并相同组分并减压回收溶剂;然后经硅胶拌样后装柱,用体积比12:1的石油醚‑乙酸乙酯洗脱,薄层色谱检测,合并相同组分并减压回收溶剂,即得5,8‑羟基‑2甲基‑4H‑1‑苯并吡喃环‑4‑酮纯品。
6.如权利要求1所述从光炭轮菌属真菌中提取色酮、萘酚类化合物的方法,其特征在于,步骤6)中,(4S) 4,5‑二羟基‑3,4‑二氢‑1(2H)‑酮粗品经Sephadex LH‑20凝胶柱层析,用体积比1:1的甲醇‑二氯甲烷洗脱,薄层色谱检测,合并相同组分并减压回收溶剂;然后经硅胶柱层析,用体积比20:1的二氯甲烷‑甲醇洗脱,薄层色谱检测,合并相同组分并减压回收溶剂;即得(4S) 4,5‑二羟基‑3,4‑二氢‑1(2H)‑酮纯品。
7.如权利要求2所述从光炭轮菌属真菌中提取色酮、萘酚类化合物的方法,其特征在于,步骤1)中,真菌预先经过活化和初级培养;
所述活化具体为:将光炭轮菌接种到PDA培养基上,室温条件培育3‑5天,即得到活化后的菌种;
所述初级培养具体为:将活化后的菌种接种到PDB培养基上,在25 30℃条件下摇床培~
养4‑6天,得到种子液。