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专利号: 2022101164588
申请人: 山东润德生物科技有限公司
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-10-10
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种重组大肠杆菌,其特征在于,以大肠杆菌为出发菌株,过表达具有若干个T7lac启动子控制的gna1基因与具有若干个T7lac启动子控制的glmS基因,并敲除manX基因、manY基因、manZ基因、nagA基因、nagB基因、nagE基因、poxB基因和ldhA基因所得。

2.根据权利要求1所述的重组大肠杆菌,其特征在于,编码所述gna1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;编码所述glmS基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示;编码所述manX基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示;编码所述manY基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示;编码所述manZ基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示;编码所述nagA基因的核甘酸序列如SEQ ID NO.6所示;编码所述nagB基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示;编码所述nagE基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示;编码所述poxB基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示;编码所述ldhA基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.10所示;编码所述T7lac启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO.11所示。

3.根据权利要求1所述的重组大肠杆菌,其特征在于,所述大肠杆菌为

E.coliATCC25947(DE3)、E.coliK12 MG1655(DE3)或E.coli W3110(DE3)。

4.根据权利要求3所述的重组大肠杆菌,其特征在于,所述大肠杆菌为

E.coliATCC25947(DE3)。

5.权利要求1‑4任一项所述的重组大肠杆菌在发酵生产N‑乙酰氨基葡萄糖中的应用。

6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述发酵条件为36.5~37.5℃、pH=6.8~

7.2,发酵时间65h或以上。

7.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述发酵生产中加入IPTG和乳糖。

8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述IPTG的浓度为0.1~0.4mmol/L。

9.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述乳糖在发酵过程补料糖中添加,浓度为15~25g/L。

10.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述发酵生产的发酵培养基成分:胰蛋白胨12g/L,酵母粉24g/L,磷酸氢二钾12.54g/L,磷酸二氢钾2.31g/L和甘油4g/L。