1.一种重组大肠杆菌,其特征在于,以大肠杆菌为出发菌株,过表达具有至少两个T7lac启动子控制的gna1基因与具有至少一个T7lac启动子控制的glmS基因,并敲除manX基因、manY基因、manZ基因、nagA基因、nagB基因、nagE基因、fucIK基因、poxB基因和ldhA基因所得;
编码所述gna1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;编码所述glmS基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示;编码所述manX基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示;编码所述manY基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示;编码所述manZ基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示;编码所述nagA基因的核甘酸序列如SEQ ID NO.6所示;编码所述nagB基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示;编码所述nagE基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示;编码所述poxB基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示;编码所述ldhA基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.10所示;编码所述T7lac启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO.11所示;所述fucIK基因的上游引物序列为taatgccagcgatatcgcgagttttagagctagaaatagcaagttaaaataaggc;fucIK基因的下游引物序列为cagctagctcagtcctaggtataatactagttaatgccagcgatatcgcga。
2.根据权利要求1所述的重组大肠杆菌,其特征在于,所述大肠杆菌为E.coli ATCC25947(DE3)、E.coli K12 MG1655(DE3)或E.coli W3110(DE3)。
3.根据权利要求2所述的重组大肠杆菌,其特征在于,所述大肠杆菌为E.coli ATCC25947(DE3)。
4.权利要求1‑3任一项所述的重组大肠杆菌在发酵生产N‑乙酰氨基葡萄糖中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述发酵条件为36.5 37.5 ℃、pH=6.8~ ~
7.2,发酵时间65 h或以上。
6.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述发酵生产中加入IPTG和乳糖。
7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,所述IPTG的浓度为0.1 0.4 mmol/L。
~
8.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,所述乳糖在发酵过程补料糖中添加,浓度为15 25 g/L。
~
9.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述发酵生产的发酵培养基成分:胰蛋白胨12 g/L,酵母粉24 g/L,磷酸氢二钾12.54 g/L,磷酸二氢钾2.31 g/L和甘油4 g/L。