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专利号: 2022101817029
申请人: 华南农业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种愈伤组织特异强启动子Pcsp,其特征在于,其核苷酸序列为下列序列之一:(1)SEQ ID NO:1所示序列;

(2)在严格条件下与SEQ ID NO:1限定的DNA序列分子杂交的DNA分子序列;

(3)与SEQ ID NO:1限定的DNA序列具有90%以上的相似性,且能调控目的基因在愈伤组织中特异表达的DNA分子序列;

(4)在SEQ ID NO:1所示序列基础上进行部分截取或组装,且截取或组装后的序列仍能发挥启动子作用的序列。

2.根据权利要求1所述愈伤组织特异强启动子Pcsp,其特征在于,其(4)中所述部分截取或组装的规则如下:截取SEQ ID NO:1所示序列3’端长度为1288bp、848bp或443bp且仍具有启动子活性的序列;

或包含SEQ ID NO:1所示序列5’端一段长度为266bp的富含(75%)AT碱基的序列,如SEQ ID NO:29所示。

3.权利要求1所述的水稻愈伤组织特异强启动子Pcsp在构建愈伤组织中特异表达的基因表达盒中的应用。

4.根据权利要求3所述应用,其特征在于,所述基因表达盒包含权利要求1所述愈伤组织特异强启动子Pcsp及位于其下游的基因,所述基因为筛选标记基因、核酸酶编码基因或目标功能基因。

5.根据权利要求4所述应用,其特征在于,所述筛选标记基因为在植物中表达的编码可产生颜色变化的酶或发光化合物的基因,具有抗抗生素、抗化学试剂或抗除草剂的基因;所述核酸酶编码基因为CRISPR/Cas核酸酶编码基因;所述目标功能基因为需要在愈伤组织中表达但不需要在植株中表达的基因。

6.根据权利要求5所述应用,其特征在于,所述筛选标记基因可为但不限于GUS基因、GFP/YFP荧光基因、Luc荧光素酶基因、NPT II抗卡那霉素基因、HPT抗潮霉素基因或Bar抗除草剂基因;所述CRISPR/Cas核酸酶编码基因可为SpCas9及其变体编码基因、ScCas9基因、SaCas9基因、Cas12a基因或Cas13a基因;所述目标功能基因可为在愈伤组织发挥作用的基因。

7.权利要求1或2所述的水稻愈伤组织特异强启动子Pcsp在构建愈伤组织中特异表达的表达载体中的应用,其特征在于,所述表达载体包含权利要求1或2所述愈伤组织特异启动子Pcsp,或是包含权利要求4~6任一中所述的基因表达盒。

8.权利要求7中所述表达载体在筛选转基因愈伤细胞、分化出转基因植株、对愈伤组织细胞系进行基因编辑中的应用。

9.权利要求7中所述表达载体在植物遗传转化与基因编辑中的应用。

10.携带权利要求1或2所述的愈伤组织特异强启动子Pcsp的转基因细胞系或宿主菌。