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专利号: 2022102368455
申请人: 大连海洋大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 有机化学〔2〕
更新日期:2025-03-12
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种罗非鱼皮抗氧化肽,其特征在于:所述罗非鱼皮抗氧化肽的氨基酸序列为Gly‑Gly‑Tyr‑Asp‑Glu‑Tyr。

2.一种如权利要求1所述罗非鱼皮抗氧化肽的制备方法,其特征在于依次按照如下步骤进行:a. 将罗非鱼皮清洗搅碎后加入碱性蛋白酶进行酶解,得到罗非鱼皮酶解液,所述酶解条件是pH8.0 12.0、温度35 65℃、加酶量为总质量的1 6%、料液比为1:20 80g/ml、酶解时~ ~ ~ ~间为5.0 15.0h;

~

b. 将罗非鱼皮酶解液沸水浴灭酶并快速冷却,4℃条件下10000r/min离心10 20min,~取上清液;

c. 将上清液进行超滤膜过滤,得分子量≤1000的组分;

d. 利用反相高效液相色谱仪对分子量≤1000的组分进行分离,得到分子量为702Da,氨基酸序列为Gly‑Gly‑Tyr‑Asp‑Glu‑Tyr的罗非鱼皮抗氧化肽。

3.根据权利要求2所述的罗非鱼皮抗氧化肽的制备方法,其特征在于依次按照如下步骤进行:a. 将罗非鱼皮清洗搅碎后加入碱性蛋白酶进行酶解,得到罗非鱼皮酶解液,所述酶解条件是pH10.0、温度51℃、加酶量为总质量的2.51%、料液比为1:5 0g/ml、酶解时间为9.0h;

b. 将罗非鱼皮酶解液沸水浴灭酶15min并快速冷却,4℃条件下10000r/min离心

15min,取上清液;

c. 将上清液进行超滤膜过滤,得分子量≤1000的组分;

d. 利用反相高效液相色谱仪对分子量≤1000的组分进行分离,得到分子量为702Da,氨基酸序列为Gly‑Gly‑Tyr‑Asp‑Glu‑Tyr的罗非鱼皮抗氧化肽。

4.根据权利要求2或3所述的罗非鱼皮抗氧化肽的制备方法,其特征在于所述d步骤的分离条件是:色谱柱为PREP‑ODS(H)KIT,250×20mmI.D;流动相为A相‑质量浓度为5%的乙腈溶液,B相‑质量浓度为80%的乙腈溶液,A相和B相的乙腈溶液中均含质量百分比为0.1%的TFA;以B相10%、0‑10min、B相10‑80%、10‑15min及B相80‑10%、30‑40min进行梯度洗脱;上样量为700μL,流速为7ml/min,检测波长为220nm。