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专利号: 2022102535439
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-10-10
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种糖基转移酶突变体,其特征在于,为如下(a)或(b)的蛋白质:(a)氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的蛋白质;

(b)在如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列基础之上经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸序列并且具有催化莱鲍迪苷D为莱鲍迪苷M的酶活性的由(a)衍生的蛋白质。

2.编码权利要求1所述糖基转移酶突变体的基因。

3.携带权利要求2所述基因的表达载体。

4.表达权利要求1所述糖基转移酶突变体的重组菌。

5.一种催化合成莱鲍迪苷M的方法,其特征在于,以莱鲍迪苷D为底物,利用权利要求1所述糖基转移酶突变体与蔗糖合酶偶联进行催化反应。

6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述蔗糖合酶的氨基酸序列可以是任意来源的具有蔗糖合酶活性的氨基酸序列。

7.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述糖基转移酶UGT76G1突变体和蔗糖合酶的摩尔浓度比为1:1。

8.根据权利要求5~7所述的方法,其特征在于,所述催化反应的条件为:1‑20mM莱鲍迪苷D、0‑1000mmol/L蔗糖、0.1‑1mM UDP、50mM K2HPO4‑KH2PO4缓冲液为反应体系,20‑45℃反应0‑24h。

9.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述催化反应的第0.5h,1h和2h分别添加

5mM Reb D。

10.权利要求1所述糖基转移酶突变体或权利要求2所述基因或权利要求3所述表达载体或权利要求4所述重组菌或权利要求5~9任一所述方法在制备含有莱鲍迪苷M的产品中的应用。