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专利号: 2022103815117
申请人: 江苏农牧科技职业学院
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 农业;林业;畜牧业;狩猎;诱捕;捕鱼
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种猪冷冻精液的保藏方法,其特征在于,所述保藏方法包括:

将猪精液在预处理剂中混合进行预处理,得到预处理精液;

将所述预处理精液与稀释剂混合进行稀释,得到稀释精液;

将所述稀释精液进行程序冷冻,得到冷冻精液;

其中,以100g的水计,所述稀释剂包含:5‑12g的甘油、4‑6g的PVA、6‑10g的多聚谷氨酸、0.6‑3g的乳糖、0.02‑0.08g的β‑半乳糖苷酶和100g的水、22‑30g的葡萄糖、4‑8g的柠檬酸钠、2‑3.2g的N‑2‑羟乙基哌嗪‑N'‑2‑乙磺酸钠、4‑7g的Tris、1.5‑4g的EDTA‑Na2、0.1‑0.5g的半胱氨酸和20‑50g的蛋黄稀释液;

所述预处理剂包含:2‑5g的氯化钠,3‑8mM的氨基酸,0.1‑0.5g的磷酸肌酸和100g的水;

所述多聚谷氨酸的分子量为7万‑10万。2.根据权利要求1所述的保藏方法,其特征在于,所述方法还包含稀释剂的制备,其中,制备所述稀释剂的方法包括:将多聚谷氨酸、乳糖以及β‑半乳糖苷酶在水中混合后,在20‑40℃下反应5‑40h,pH为3‑5,然后加入葡萄糖、柠檬酸钠、N‑2‑羟乙基哌嗪‑N '‑2‑乙磺酸钠、Tris、EDTA‑Na2、半胱氨酸、蛋黄稀释液混合均匀,得到所述稀释剂。

3.根据权利要求1所述的保藏方法,其特征在于,所述乳糖与所述多聚谷氨酸的重量比为1:1‑10。

4.根据权利要求1所述的保藏方法,其特征在于,所述PVA的分子量为20000‑220000。

5.根据权利要求1所述的保藏方法,其特征在于,所述预处理包括:在18‑22℃下,将所述猪精液放置在所述预处理剂中静置0 .2‑2h,然后进行离心,除去上清液,得到预处理精液。

6.根据权利要求5所述的保藏方法,其特征在于,所述猪精液预所述预处理剂的体积比为1:3‑8。

7.根据权利要求1‑6中任意一项所述的保藏方法,其特征在于,所述程序冷冻的方法包括:将所述稀释精液以1‑2℃/  min的速率降温至0℃至‑5℃,并保温10‑30min,然后放入液氮中降温至‑196℃。