1.一种突变果胶裂解酶PGLA‑rep4编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.一种突变果胶裂解酶PGLA‑rep4的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；

优选的，一种重组载体，包含权利要求1所述突变果胶裂解酶PGLA‑rep4编码基因的核苷酸序列，如SEQ ID NO.1所示；

优选的，一种重组菌，包含权利要求1所述突变果胶裂解酶PGLA‑rep4编码基因的核苷酸序列，如SEQ ID NO.1所示。

3.一种含突变果胶裂解酶PGLA‑rep4基因的大肠杆菌工程菌的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)将合成的pET‑28a(+)‑PGLA质粒通过正向PCR扩增pET‑28a(+)‑PGLA‑4基因片段，其核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；

(2)通过正向PCR扩增rep4基因片段，其核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示；

(3)将步骤(1)中制得的pET‑28a(+)‑PGLA‑4基因片段与步骤(2)制得的rep4基因片段进行无缝克隆连接，得到重组质粒pET‑28a(+)‑PGLA‑rep4；

(4)制备大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞，将步骤(3)制得的重组质粒pET‑28a(+)‑PGLA‑rep4转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞，筛选阳性克隆，即得含突变果胶裂解酶PGLA‑rep4的大肠杆菌工程菌；

优选的，所述步骤(1)中，正向PCR扩增以pET‑28a(+)‑PGLA质粒为模板，扩增引物分别为F1、R1，扩增引物的核苷酸序列分别为SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.6；

优选的，所述步骤(1)中，PCR扩增的反应体系如下，总体系为50μl：PCR扩增程序如下：

95℃预变性3min；95℃变性15sec，60℃退火15sec，72℃延伸3.2min，30个循环；72℃延伸5min，4℃保存；

优选的，所述步骤(2)中，正向PCR扩增模板为Pel SWU基因片段，基因序列在NCBI数据库中的登录号为AB428424，扩增引物分别为F2、R2，扩增引物的核苷酸序列分别为SEQ ID NO.7、SEQ ID NO.8；

优选的，所述步骤(2)中，PCR扩增的反应体系如下，总体系为50μl：所述的PCR扩增程序如下：

95℃预变性3min；95℃变性15sec，60℃退火15sec，72℃延伸15sec，30个循环；72℃延伸5min，4℃保存；

优选的，所述步骤(3)中，无缝克隆PCR扩增体系如下，总体系为20μl：所述的无缝克隆程序如下：

37℃反应30min，4℃保存；

优选的，所述步骤(4)中，筛选阳性克隆的方法为：将转化细胞涂布在含有50μg/mL卡纳霉素的LB固体培养基上，37℃过夜培养，挑取单菌落接种至含有50μg/mL卡那霉素的LB液体培养基中37℃培养过夜，然后通过PCR验证，得到目的基因条带的阳性克隆子，然后测序，保留测序结果正确的菌株作为目的表达菌株。

4.一种突变果胶裂解酶PGLA‑rep1编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示。

5.一种突变果胶裂解酶PGLA‑rep1的氨基酸序列如SEQ ID NO.10所示；

优选的，一种重组载体，包含权利要求4所述突变果胶裂解酶PGLA‑rep1编码基因的核苷酸序列，如SEQ ID NO.9所示；

优选的，一种重组菌，包含权利要求4所述突变果胶裂解酶PGLA‑rep1编码基因的核苷酸序列，如SEQ ID NO.9所示。

6.一种含突变果胶裂解酶PGLA‑rep1基因的大肠杆菌工程菌的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：①通过反向PCR直接扩增得到pET‑28a(+)‑PGLA‑rep1质粒，其核苷酸序列如SEQ ID NO.11所示；

②制备大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞，将步骤①制得的重组质粒pET‑28a(+)‑PGLA‑rep1转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞，筛选阳性克隆，即得含突变果胶裂解酶PGLA‑rep1的大肠杆菌工程菌；

优选的，所述步骤①中，反向PCR扩增以pET‑28a(+)‑PGLA质粒为模板，扩增引物分别为F1‑1、R1‑1，扩增引物的核苷酸序列分别为SEQ ID NO.12、SEQ ID NO.13；

优选的，所述步骤①中，PCR扩增的反应体系如下，总体系为50μl：PCR扩增程序如下：

95℃预变性3min；95℃变性15sec，60℃退火15sec，72℃延伸3.5min，30个循环；72℃延伸5min，4℃保存；

优选的，所述步骤②中，筛选阳性克隆的方法为：将转化细胞涂布在含有50μg/mL卡纳霉素的LB固体培养基上，37℃过夜培养，挑取单菌落接种至含有50μg/mL卡那霉素的LB液体培养基中37℃培养过夜，然后通过PCR验证，得到目的基因条带的阳性克隆子，然后测序，保留测序结果正确的菌株作为目的表达菌株。

7.一种突变果胶裂解酶PGLA‑rep2编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.14所示。

8.一种突变果胶裂解酶PGLA‑rep2的氨基酸序列如SEQ ID NO.15所示；

优选的，一种重组载体，包含权利要求7所述突变果胶裂解酶PGLA‑rep2编码基因的核苷酸序列，如SEQ ID NO.14所示；

优选的，一种重组菌，包含权利要求7所述突变果胶裂解酶PGLA‑rep2编码基因的核苷酸序列，如SEQ ID NO.14所示。

9.一种含突变果胶裂解酶PGLA‑rep2基因的大肠杆菌工程菌的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：<1>将合成的pET‑28a(+)‑PGLA质粒通过正向PCR扩增pET‑28a(+)‑PGLA‑2基因片段，其核苷酸序列如SEQ ID NO.16所示；

<2>通过正向PCR扩增rep2基因片段，其核苷酸序列如SEQ ID NO.17所示；

<3>将步骤<1>中制得的pET‑28a(+)‑PGLA‑2基因片段与步骤(2)制得的rep2基因片段进行无缝克隆连接，得到重组质粒pET‑28a(+)‑PGLA‑rep2；

<4>制备大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞，将步骤<3>制得的重组质粒pET‑28a(+)‑PGLA‑rep2转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞，筛选阳性克隆，即得含突变果胶裂解酶PGLA‑rep2的大肠杆菌工程菌；

优选的，所述步骤<1>中，正向PCR扩增以pET‑28a(+)‑PGLA质粒为模板，扩增引物分别为F1‑1‑1、R1‑1‑1，扩增引物的核苷酸序列分别为SEQ ID NO.18、SEQ ID NO.19；

优选的，所述步骤<1>中，PCR扩增的反应体系如下，总体系为50μl：PCR扩增程序如下：

95℃预变性3min；95℃变性15sec，60℃退火15sec，72℃延伸3.2min，30个循环；72℃延伸5min，4℃保存；

优选的，所述步骤<2>中，正向PCR扩增模板为Pel SWU基因片段，基因序列在NCBI数据库中的登录号为AB428424，扩增引物分别为F1‑1‑2、R1‑1‑2，扩增引物的核苷酸序列分别为SEQ ID NO.20、SEQ ID NO.21；

优选的，所述步骤<2>中，PCR扩增的反应体系如下，总体系为50μl：所述的PCR扩增程序如下：

95℃预变性3min；95℃变性15sec，60℃退火15sec，72℃延伸15sec，30个循环；72℃延伸5min，4℃保存；

优选的，所述步骤<3>中，无缝克隆PCR扩增体系如下，总体系为20μl：所述的无缝克隆程序如下：

37℃反应30min，4℃保存；

优选的，所述步骤<4>中，筛选阳性克隆的方法为：将转化细胞涂布在含有50μg/mL卡纳霉素的LB固体培养基上，37℃过夜培养，挑取单菌落接种至含有50μg/mL卡那霉素的LB液体培养基中37℃培养过夜，然后通过PCR验证，得到目的基因条带的阳性克隆子，然后测序，保留测序结果正确的菌株作为目的表达菌株。

10.权利要求2中所述重组菌、权利要求5中所述重组菌或权利要求8中所述重组菌在生产果胶裂解酶中的应用。