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专利号: 2022104906626
申请人: 赣南师范大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2024-11-06
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.柑橘木虱泛素结合酶E2J2基因在防控柑橘黄龙病中的应用,其特征在于,所述柑橘木虱泛素结合酶E2J2基因的cDNA序列如SEQ ID NO.1所示。

2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述E2J2基因通过降低CLas侵染柑橘木虱发挥作用。

3.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述柑橘木虱泛素结合酶E2J2基因编码的蛋白氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

4.一种降低CLas侵染柑橘木虱的方法,其特征在于,包括如下步骤:将权利要求1所述的E2J2基因在柑橘木虱中进行基因沉默。

5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述基因沉默为采用RNA干扰技术进行基因沉默。

6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述RNA干扰技术包括如下步骤:以柑橘木虱cDNA为模板,通过PCR技术,使用扩增引物获得E2J2基因的部分片段,扩增产物连接入质粒中,以质粒为模板,用含启动子的引物进行扩增,扩增产物胶回收,合成dsRNA;稀释合成的dsRNA,饲喂柑橘木虱。

7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述扩增引物为PT‑F:5'ATTCAAACCACCAAGCATCT 3',PT‑R:5'TCTTCTTGTGCTCGTCTGTCT 3'。

8.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述含启动子的引物为RNAi‑F:TAATACGACTCACTATAGGGATTCAAACCACCAAGCATCT,RNAi‑R:TAATACGACTCACTATAGGGTCTTCTTGTGCTCGTCTGTCT。

9.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述质粒为pMD19‑t质粒。

10.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,饲喂的柑橘木虱为4‑5龄柑橘木虱若虫。