1.一种利用米曲霉制备L‑色氨酸‑L‑丙氨酸环二肽的方法，其特征在于该制备方法按以下步骤进行：步骤S1：表达质粒pMA‑criC的构建；

以pMA质粒经KpnI酶切线性化处理的片段为载体，将环二肽合酶编码基因 SEQ ID NO.1插入pMA质粒的限制性位点KpnI，获得表达质粒pMA‑criC；

步骤S2：携带有L‑色氨酸‑L‑丙氨酸环二肽的高产菌株的获得；

取米曲霉（Aspergillus oryzae）的孢子保存液接入DPY培养基中，振荡培养2 3天，获~得米曲霉（Aspergillus oryzae）的菌体；然后加入细胞壁溶解液，温和振荡2 3小时，获得~原生质体；向原生质体内加入缓冲液II和缓冲液III，再加入表达质粒pMA‑criC，混匀后冰浴18 20 min，向混合体系加入缓冲液III，室温孵育18 20 min，然后加入缓冲液II，混匀后~ ~离心8 10 min，除去上清液后加入缓冲液II，混匀后转移到改良的察氏培养基平板上，然后~加入覆盖培养基，倒置培养3 7天；待上述培养基长出菌丝后，利用PCR对其验证，阳性转化~子进行2次继代培养后，获得携带有L‑色氨酸‑L‑丙氨酸环二肽的高产菌株；

所述的缓冲液II由1.2M山梨糖醇、50mM氯化钙溶液、50mM氯化钠溶液和10mM氨基丁三醇组成，且pH调至7.5；所述的缓冲液III由40%聚乙二醇‑4000、50 mM氯化钙溶液和50 mM氨基丁三醇组成；所述的改良的察氏培养基按以下步骤制备：每200 mL改良的察氏培养基含有7.0 g察氏培养基、9.3 g NaCl、1.8 g (NH4)2SO4、20 mg腺嘌呤、300 mg甲硫氨酸和3 g琼脂粉；

步骤S3：L‑色氨酸‑L‑丙氨酸环二肽的制备；

将携带有L‑色氨酸‑L‑丙氨酸环二肽的高产菌株的菌丝接种于灭菌后的填装有大米的培养基中，对培养基萃取、浓缩，获得发酵液浸膏；将发酵液浸膏通过高效液相色谱仪制备，得到L‑色氨酸‑L‑丙氨酸环二肽。

2.根据权利要求1所述的一种利用米曲霉制备L‑色氨酸‑L‑丙氨酸环二肽的方法，其特征在于步骤S2中基于表达质粒pMA‑criC的L‑色氨酸‑L‑丙氨酸环二肽的高产菌株的培养的步骤如下：取米曲霉（Aspergillus oryzae）的孢子保存液接入到含有100 mL的DPY培养基中，在28 30℃下、以180 200 rpm的转速振荡培养2 3天，获得米曲霉（Aspergillus ~ ~ ~oryzae）的菌体；将米曲霉（Aspergillus oryzae）的菌体过滤收集后用无菌水洗涤3 5次，~然后加入20 mL细胞壁溶解液，并在25 28℃的温度条件下，温和振荡2 3小时，获得原生质~ ~体；利用灭菌过的0.8M NaCl溶液洗涤将原生质洗涤2次，加入缓冲液II和缓冲液III，再加入10 μg表达质粒pMA‑criC，混匀后冰浴18 20 min，向混合体系加入1 mL缓冲液III，室温~孵育20分钟，然后加入10 mL缓冲液II，混匀后，在2 4℃下以600 800 rpm的转速离心8 10 ~ ~ ~min，除去上清液后加入1 mL缓冲液II，混匀后移取200μL混匀液转移到改良的察氏培养基平板上，然后加入5mL、45 50℃的覆盖培养基，待覆盖培养基凝固后封平板，倒置培养3 7~ ~天；待含有pMA‑criC转化子长出菌丝后，利用PCR对其验证，阳性转化子进行2次继代培养后，获得L‑色氨酸‑L‑丙氨酸环二肽的高产菌株。

3.根据权利要求1或2所述的一种利用米曲霉制备L‑色氨酸‑L‑丙氨酸环二肽的方法，其特征在于所述的DPY培养基按以下步骤制备：2 g糊精、1 g聚蛋白胨、0.5 g酵母粉、10 mg腺嘌呤、925 mg硫酸铵、150 mg甲硫氨酸和60 mg精氨酸，加水定量至100mL；覆盖培养基由

1.2 M山梨糖醇和0.5%琼脂粉组成。

4.根据权利要求1或2所述的一种利用米曲霉制备L‑色氨酸‑L‑丙氨酸环二肽的方法，其特征在于所述的细胞壁溶解液由1.0%亚糖酶溶于溶液I中制成；所述的溶液I由0.8 M 氯化钠溶液和10 mM 磷酸二氢钠溶液组成。

5.根据权利要求1所述的一种利用米曲霉制备L‑色氨酸‑L‑丙氨酸环二肽的方法，其特征在于步骤S3中将携带L‑色氨酸‑L‑丙氨酸环二肽的高产菌株的菌丝接种于灭菌后的填装有大米的培养基中，并在25 28℃下静置培养两周；利用乙酸乙酯对培养基萃取3 5次，浓缩~ ~获得发酵液浸膏；利用正相色谱对发酵液浸膏进行粗分，然后利用反相色谱进行细分，再通过高效液相色谱仪制备，得到L‑色氨酸‑L‑丙氨酸环二肽。

6.根据权利要求1所述的一种利用米曲霉制备L‑色氨酸‑L‑丙氨酸环二肽的方法，其特征在于步骤S1中pMA质粒的质量与KpnI的体积的比为1μg：1μL。