1.一种AIE型偶氮酶荧光小分子探针,是以三苯胺衍生物为主体发光单元、偶氮基团为特异性识别基团,通过witting‑horner化反应缩合制得,具有如下结构式:其中,R1为
2.如权利要求1所述的AIE型偶氮酶荧光小分子探针的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:S1:制备三苯胺衍生物
S1‑1、咔唑修饰三苯胺衍生物:将4,4′‑二溴‑4″‑甲酰基三苯胺,咔唑衍生物加入到反应瓶中,加入碘化亚铜,将1,10‑邻菲罗啉和碳酸钾混合溶解在N,N‑二甲基甲酰胺中加入到反应瓶中;氮气保护下加热至160℃反应;反应结束后将反应混合物冷却至室温,倒入冰水中;过滤并干燥,柱层析得固体,即咔唑修饰三苯胺衍生物;
S1‑2、联噻吩修饰三苯胺衍生物:将噻吩硼酸酯衍生物和4,4′‑二溴‑4″‑甲酰基三苯胺加入到反应瓶中,加入Pd(PPh3)4、碳酸钾和DMF,将混合物在85℃下加热12h;冷却至室温后,加入水,用1N盐酸调整pH值至弱酸度,有黄色固体沉淀;然后通过柱层析提纯得联噻吩修饰三苯胺衍生物;
S1‑3、吡啶乙烯基修饰三苯胺衍生物:氮气保护下,向盛有DMF 100mL的双口瓶中加入
4‑乙烯基吡啶和4,4′‑二溴‑4″‑甲酰基三苯胺,加入醋酸钯、三(邻甲基苯基)膦和无水磷酸钾,磁力搅拌下,油浴加热至120℃反应24h;反应结束后,将反应液滤入无水甲醇中,抽滤,得到淡黄色固体,即吡啶乙烯基修饰三苯胺衍生物;
S2:氮气保护下,将化合物4,4’‑二溴甲基偶氮苯溶于100ml亚磷酸三甲酯中,然后缓慢升温到150℃保温36小时,反应结束后,将反应液倒入石油醚中,大量黄色固体析出,减压抽得,干燥,甲醇重结晶得亚磷酸酯修饰偶氮苯衍生物;
S3:氮气保护下,向含有DMF的反应瓶中加入S1‑1或S1‑2或S1‑3制得的化合物以及S2制得的亚磷酸酯修饰偶氮苯衍生物,加入叔丁醇钾,60‑120℃加热回流24小时,反应完成后倒入水中,调节pH至弱酸性,抽滤干燥、纯化得深黄色固体;即得AIE型偶氮酶荧光小分子探针。