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专利号: 2022105579481
申请人: 河南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 有机化学〔2〕
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种抗SAI/II单链抗体,所述单链抗体包含重链可变区和轻链可变区,所述重链可变区中CDR的氨基酸序列依次如SEQ ID NO.:3‑5所示,所述轻链可变区中CDR的氨基酸序列依次如SEQ ID NO.:6‑8所示。

2.如权利要求1所述单链抗体,所述重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.:1的第1‑

113位所示。

3.如权利要求1所述单链抗体,所述轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.:1的第

129‑234位所示。

4.如权利要求1所述单链抗体,所述重链可变区与轻链可变区通过连接子连接,所述连接子由G和/或S组成。

5.如权利要求4所述单链抗体,所述连接子是(GGGGS)n。

6.如权利要求5所述单链抗体,所述n=3。

7.如权利要求1所述单链抗体,所述单链抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO.:1所示。

8.一种包含权利要求1所述单链抗体的融合蛋白,所述融合蛋白还包括人IgG1的Fc片段、c型溶菌酶的氨基酸序列、信号肽;

所述包括信号肽、权利要求1所述单链抗体、人IgG1的Fc片段、溶菌酶的氨基酸序列的融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.:13所示。

9.编码权利要求1所述单链抗体或编码权利要求8所述融合蛋白的多核苷酸。

10.如权利要求9所述多核苷酸,所述多核苷酸是双链DNA。

11.如权利要求9所述多核苷酸,所述编码权利要求1所述单链抗体的多核苷酸选自以下任意一种:

1)与SEQ ID NO.:2所示序列有85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%以上同源性、

2)与SEQ ID NO.:2所示序列部分互补或完全互补、

3)如SEQ ID NO.:2所示。

12.如权利要求9所述多核苷酸,编码权利要求8所述融合蛋白的多核苷酸选自以下任意一种:

1)与SEQ ID NO.:14所示序列有85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%以上同源性、

2)与SEQ ID NO.:14所示序列部分互补或完全互补、

3)如SEQ ID NO.:14所示。

13.一种载体,所述载体包含编码权利要求1所述单链抗体或编码权利要求8所述融合蛋白的多核苷酸;

或者,所述载体表达权利要求1所述单链抗体或权利要求8所述融合蛋白。

14.如权利要求13所述载体,所述载体包括质粒、慢病毒载体、腺病毒载体或逆转录病毒载体。

15.如权利要求13所述载体,所述载体上还包括一种或多种调控元件。

16.如权利要求15所述载体,所述调控元件包含启动子、增强子、翻译起始的核糖体结合位点、终止子、多聚腺苷酸序列或筛选标记基因。

17.制备含有、表达权利要求1所述单链抗体或权利要求8所述融合蛋白的细胞的方法,所述方法包括将权利要求9所述的多核苷酸和/或权利要求13所述的载体转化到细胞中。

18.如权利要求17所述方法,所述转化的方法包括病毒感染、电穿孔、脂质转染或粒子轰击。

19.一种宿主细胞,所述宿主细胞中包含权利要求1所述单链抗体、权利要求8所述融合蛋白、权利要求9所述的多核苷酸、权利要求13所述的载体中的一种或多种;

或者,所述宿主细胞是权利要求17所述方法所制备得到的细胞。

20.如权利要求19所述宿主细胞,所述宿主细胞包括原核细胞、原生生物细胞、真菌细胞、植物细胞和动物细胞。

21.如权利要求20所述宿主细胞,所述动物细胞包括293细胞、CHO‑K1细胞、HEK293细胞、Caco2细胞、U2‑OS细胞、NIH 3T3细胞、NSO细胞、SP2细胞、CHO‑S细胞、DG44细胞、K‑562细胞、U‑937细胞、MRC5细胞、IMR90细胞、Jurkat细胞、HepG2细胞、HeLa细胞、HT‑1080细胞、HCT‑116细胞、Hu‑h7细胞、Huvec细胞、Molt 4细胞。

22.一种药物组合物,所述药物组合物包含权利要求1所述单链抗体或权利要求8所述融合蛋白。

23.如权利要求22所述药物组合物,所述药物组合物还包含药学上可接受的缓冲液、稳定剂和表面活性剂。

24.一种检测SAI/II的方法,所述方法包括将权利要求1所述单链抗体或权利要求8所述融合蛋白与待检测样品接触的步骤;

所述检测是非诊断目的的。

25.权利要求1所述单链抗体、权利要求8所述融合蛋白、权利要求9所述的多核苷酸、权利要求13所述的载体、权利要求19所述宿主细胞、权利要求22所述药物组合物在制备鉴定S. Mutans、抑制S. Mutans生物膜形成、凝集S. Mutans的产品中的应用。

26.权利要求1所述单链抗体、权利要求8所述融合蛋白、权利要求9所述的多核苷酸、权利要求13所述的载体、权利要求19所述宿主细胞、权利要求22所述药物组合物在制备治疗S. Mutans感染、抑制S. Mutans粘附牙齿、预防龋齿的产品中的应用。