1.一种利用低共熔溶剂提取香榧假种皮中黄酮类化合物的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)预处理
将新鲜的香榧假种皮烘干,粉碎后获得干燥的香榧假种皮粉末,备用;
(2)酶解
取步骤(1)准备好的香榧假种皮粉末,加入酶液,在25~35℃下酶解2~4h,得到酶解产物;
所述酶液为纤维素酶液和果胶酶液的混合物;
(3)微波处理
对步骤(2)所得酶解产物进行微波处理;
所述微波处理的功率为700~900W,处理时间为80~100s;
(4)提取
在经过步骤(3)微波处理的体系中加入低共熔溶剂,超声辅助提取1~3h,之后离心,获得的上清液即为香榧假种皮黄酮提取液;
所述低共熔溶剂由氯化胆碱和三乙二醇合成。
2.如权利要求1所述的利用低共熔溶剂提取香榧假种皮中黄酮类化合物的方法,其特征在于,步骤(2)中,所述纤维素酶液和果胶酶液均为2000u/mL,纤维素酶液在总酶液中的体积占比为60~70%;所述纤维素酶液由纤维素酶溶于pH=5的磷酸盐缓冲液中得到;所述果胶酶液由果胶酶溶于pH=5的磷酸盐缓冲液中得到。
3.如权利要求2所述的利用低共熔溶剂提取香榧假种皮中黄酮类化合物的方法,其特征在于,所述纤维素酶液在总酶液中的体积占比为64%。
4.如权利要求1所述的利用低共熔溶剂提取香榧假种皮中黄酮类化合物的方法,其特征在于,步骤(4)中,所述低共熔溶剂的合成方法为:将氯化胆碱、三乙二醇和水混合,在60~70℃下搅拌至均一稳定的液体,即得。
5.如权利要求4所述的利用低共熔溶剂提取香榧假种皮中黄酮类化合物的方法,其特征在于,所述氯化胆碱与三乙二醇的摩尔比为1:1~6,所得低共熔溶剂中含水量在0~
60%。
6.如权利要求5所述的利用低共熔溶剂提取香榧假种皮中黄酮类化合物的方法,其特征在于,所述氯化胆碱与三乙二醇的摩尔比为1:5.5,所得低共熔溶剂中含水量在0。
7.如权利要求1所述的利用低共熔溶剂提取香榧假种皮中黄酮类化合物的方法,其特征在于,香榧假种皮粉末与低共熔溶剂提取料液比为1:20~100g/mL。
8.如权利要求1所述的利用低共熔溶剂提取香榧假种皮中黄酮类化合物的方法,其特征在于,香榧假种皮粉末与低共熔溶剂提取料液比为1:75g/mL。
9.一种利用低共熔溶剂提取香榧假种皮中黄酮类化合物的工艺优化方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)筛选出5个影响香榧假种皮黄酮提取率的因素:提取溶剂的种类、低共熔溶剂中氢键供体和氢键受体的摩尔比、低共熔溶剂的含水量、总酶液中纤维素酶液的占比、提取料液比;
(2)以香榧假种皮提取液中黄酮含量为指标,根据步骤(1)筛选出的5个因素进行单因素实验;
(3)根据步骤(2)的单因素实验结果,选取对香榧假种皮提取液中黄酮含量影响较为显著的三个因素:低共熔溶剂氯化胆碱与氢键供体的摩尔比(A)、提取料液比(B)、总酶液中纤维素酶液的占比(C)为自变量,以香榧假种皮提取液中黄酮含量为响应值,采用Box‑Behnken设计‑响应面法设计三因素三水平的响应面分析试验;
应用统计学软件Design‑Expert 12.0对上述响应面试验设计数据进行回归拟合分析,得到香榧假种皮提取液黄酮含量(Y)的二次多项回归方程预测模型Y=19+0.7127A+1.66B‑
2 2 2
0.0533C‑0.1558AB+0.6601AC‑0.2214BC‑0.8755A ‑1.70B ‑0.3452C ;应用统计学软件Design‑Expert 12.0对提取工艺进行优化,得到最佳提取工艺条件,并根据所得最佳提取工艺进行验证试验。
最佳提取工艺条件为:低共熔溶剂中氯化胆碱与氢键供体的摩尔比1:5.44177、提取料液比1:74.545g/mL、总酶液中纤维素酶液占比63.9827%;香榧假种皮提取液黄酮含量预测值为19.5276mg/g。