1.一种多糖,其特征在于,通过如下步骤制备:
取适量血耳,加入蒸馏水,沸水浴提取,过滤收集滤液,减压浓缩、冷却、离心,离心条件为3500r/min离心10min;取上清液,加入4倍体积无水乙醇沉淀、离心,离心条件为3500r/min离心10min;收集沉淀得血耳总多糖,Sevag法脱蛋白;
取脱蛋白的血耳总多糖,用蒸馏水配制成质量分数为5%的糖液,缓慢加入硫酸铵,使得硫酸铵的浓度达到30mg/mL,静置12h,5000r/min离心20min,收集滤液;滤液继续缓慢加入硫酸铵,使得硫酸铵的浓度达到50mg/mL,静置12h,5000r/min离心20min,收集沉淀;蒸馏水复溶,用截留分子量3500u的透析袋透析,冷冻干燥得分级多糖;
取分级多糖,用蒸馏水配制成20mg/mL的糖液,3500r/min离心10min,取20mL上清液上样于内径2.5cm、柱床高度30cm的Sephadex G‑100葡聚糖凝胶层析柱,蒸馏水洗脱,流速为
2mL/min,10mL收集1管并从1开始按顺序编号,每管取少量进行苯酚‑硫酸显色测定OD490nm吸光度值,以管号为横坐标,吸光度值为纵坐标,绘制洗脱曲线,合并洗脱曲线主峰对应编号12~20的收集管中的洗脱液,合并,冷冻干燥即得。
2.根据权利要求1所述的多糖,其特征在于,Sevag法脱蛋白的具体步骤为:取血耳总多糖,用蒸馏水配制成质量分数为5%的糖液进行Sevag法脱蛋白,将糖液与Sevag试剂按体积比4:1混合,充分振荡,3500r/min离心10min,分液漏斗回收上层糖液;反复脱蛋白直至无固体蛋白层为止,将脱蛋白后的糖液冷冻干燥。
3.根据权利要求2所述的多糖,其特征在于:所述Sevag试剂为氯仿和正丁醇按体积比
4:1混合制备而成。
4.权利要求1~3任一所述的多糖用于促进NK细胞体外增殖的用途。