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专利号: 2022107955272
申请人: 淮北师范大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 农业;林业;畜牧业;狩猎;诱捕;捕鱼
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种苜蓿叶片不定芽诱导及壮苗培养的方法,其特征在于,包括以下步骤:S1、将外植体接种到愈伤组织诱导培养基中,在25±2℃下黑暗或弱光培养,得到诱导培养的愈伤组织;每升所述愈伤组织诱导培养基为:2,4‑D  4~4.5mg、6‑BA  0.2~0.4mg、NAA  0.2~0.4mg,其余为MS培养基;S2、将S1得到的诱导培养的愈伤组织接种到不定芽诱导培养基中,在25±2℃下光照培养,得到诱导出不定芽的苜蓿组织;每升所述不定芽诱导培养基为:蔗糖38~42g,其余为MS培养基;S3、将S2得到的诱导出不定芽的苜蓿组织接种到壮苗培养基中,在25±2℃下光照培养,得到再生苗;每升所述壮苗培养基为:NAA  0.7~0.9mg、6‑BA  0.2mg、水解酪蛋白580~600mg、糖26~30g,其余为MS培养基;S4、将S3得到的再生苗转接至生根培养基中,在25±2℃下光照培养,得到诱导生根的无菌苗;每升所述生根培养基为:NAA  0.5~0.7mg,其余为1/2MS培养基。2.根据权利要求1所述的苜蓿叶片不定芽诱导及壮苗培养的方法,其特征在于,S1中,所述外植体为叶片切段;所述叶片切段是将预培养的无菌苗的叶片从叶片顶部以下1/3处切开得到。3.根据权利要求1所述的苜蓿叶片不定芽诱导及壮苗培养的方法,其特征在于,S1中,所述黑暗或弱光培养的时间为60~90天;所述弱光培养的光照度<500lux。4.根据权利要求1所述的苜蓿叶片不定芽诱导及壮苗培养的方法,其特征在于,S2~S4中,所述光照培养的时间为30~60天,每天光照16h,暗培养8h;所述光照培养的光照度2000lux。5.根据权利要求1所述的苜蓿叶片不定芽诱导及壮苗培养的方法,其特征在于,S3中,所述再生苗为茎高2~4cm的再生苗。6.根据权利要求1所述的苜蓿叶片不定芽诱导及壮苗培养的方法,其特征在于,S4中,当无菌苗诱导生根的根长为1.2~2cm时,将无菌苗移栽至营养基质中。7.根据权利要求1所述的苜蓿叶片不定芽诱导及壮苗培养的方法,其特征在于,S1中,每升所述愈伤组织诱导培养基为:2,4‑D  4mg、6‑BA  0.4mg、NAA  0.2mg,其余为MS培养基。8.根据权利要求1所述的苜蓿叶片不定芽诱导及壮苗培养的方法,其特征在于,S2中,每升所述不定芽诱导培养基为:蔗糖40g,其余为MS培养基。9.根据权利要求1所述的苜蓿叶片不定芽诱导及壮苗培养的方法,其特征在于,S3中,每升所述壮苗培养基为:NAA  0.9mg、6‑BA  0.2mg、水解酪蛋白600mg、糖30g,其余为MS培养基。10.根据权利要求1所述的苜蓿叶片不定芽诱导及壮苗培养的方法,其特征在于,S4中,每升所述生根培养基为:NAA  0.5mg,其余为1/2MS培养基。