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专利号: 2022108034227
申请人: 韶关学院
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 农业;林业;畜牧业;狩猎;诱捕;捕鱼
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种利用大桥虎耳草叶柄获得再生植株的方法,其特征在于,步骤如下:S1、材料处理及表面消毒:采集并种植大桥虎耳草野生植株,取大桥虎耳草叶柄,去除叶片,将叶柄冲洗干净后,浸没在新洁尔灭溶液中搅拌,然后取出至酒精溶液中短暂浸泡,然后使用灭菌水多次清洗,随后将叶柄浸泡在氯化汞溶液中进行消毒;

S2、愈伤组织的诱导培养:将经过表面消毒的叶柄切成条状作为外植体,将外植体接种至诱导培养基上进行愈伤组织诱导培养,培养温度维持室温,暗培养诱导出愈伤组织;

S3、愈伤组织的分化培养:将叶柄诱导的愈伤组织切割后,接于分化培养基上进行分化培养,置于培养室内,培养温度维持室温,保持光照,光照时间为12h/d,诱导出不定芽;

S4、不定芽的增殖培养:将分化出的不定芽切分后转移到芽增殖培养基进行芽的增殖培养,置于培养室内,维持室温培养并维持光照,光照时间为12h/d;S5、生根培养:将增殖的不定芽切分为单芽后转入生根培养基中,置于培养室,维持室温暗培养,诱导出根系;

S6、将带有根系的新芽种植,培养出新的大桥虎耳草植株;

所述诱导培养基,分化培养基,芽增殖培养基和生根培养基均含有改良MS培养基,所述改良MS培养基为NH4NO3、KNO3、MgSO4▪7H2O和KH2PO4含量减半,CaCl2▪2H2O含量不变的MS培养基;

在步骤S2中,所述诱导培养基的组分及含量为:改良MS培养基、1~2 mg/L的KT、0.2~

0.5mg/L的NAA、2g/L的PVP、30g/L蔗糖和琼脂粉6~7g/L;或改良MS培养基、0.1~0.2mg/L的TDZ、0.2~0.5mg/L的NAA、2g/L的PVP、30g/L的蔗糖和6~7g/L的琼脂粉;

在步骤S3中,所述分化培养基的组分及含量为:改良MS培养基、1~4mg/L的6‑BA、0.1~

0.2mg/L的NAA、2g/L的PVP、30g/L蔗糖和6~7g/L的琼脂粉;

所述芽增殖培养基的组分及含量为:改良MS培养基、 2~3mg/L的6‑BA、0.2mg/L的NAA、

30mg/L的蔗糖和6~7g/L的琼脂;或改良MS培养基、0.2~0.3mg/L的TDZ、0.2mg/L的NAA、

30g/L的蔗糖和6~7g/L的琼脂粉;

在步骤S5中,所述生根培养基的组分及含量为:改良MS培养基、0.2~0.5mg/L的NAA、

30g/L的蔗糖和6~7g/L的琼脂粉;或改良MS培养基、0.2~0.5mg/L的IBA、30g/L的蔗糖和6~7g/L的琼脂粉。

2.如权利要求1所述的利用大桥虎耳草叶柄获得再生植株的方法,其特征在于,步骤S4中,将分化出的不定芽切分后,每组含有2~3芽,转移到芽增殖培养基。

3.如权利要求1‑2任一项所述的利用大桥虎耳草叶柄获得再生植株的方法,其特征在于,所述诱导培养基,分化培养基,芽增殖培养基和生根培养基的pH值均为5.8~6.0。

4.如权利要求1所述的利用大桥虎耳草叶柄获得再生植株的方法,其特征在于,在步骤S2中,将经过表面消毒的叶柄切成长度在1‑1.5cm长条状作为外植体,而且将外植体平放接种到诱导培养基上进行愈伤组织诱导培养。

5.如权利要求1所述的利用大桥虎耳草叶柄获得再生植株的方法,其特征在于,在步骤S3和步骤S4中,光照强度均为1500‑2000LX。