1.一组同时检测非洲猪瘟Ⅰ型、Ⅱ型野毒株和/或基因Ⅱ型缺失株的特异性引物和荧光探针组合,其特征在于,所述特异性引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1、2、4、5、7、8、10、11所示;所述特异性荧光探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.3、6、9、12所示。
2.根据权利要求1所述特异性引物和荧光探针组合,其特征在于,所述探针的5'端分别修饰不同的荧光基团,3'端分别修饰相应的淬灭基团。
3.根据权利要求2所述特异性引物和荧光探针组合,其特征在于,所述荧光基团为FAM、VIC、Cy5和TAMRA,所述淬灭基团为BHQ1、BHQ1、BHQ3、BHQ2。
4.权利要求1所述特异性引物和荧光探针组合在制备检测非洲猪瘟Ⅰ型、Ⅱ型野毒株和/或基因Ⅱ型缺失株试剂盒中的应用。
5.一种同时检测非洲猪瘟Ⅰ型、Ⅱ型野毒株和/或基因Ⅱ型缺失株的四重荧光定量PCR检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包含权利要求1所述的引物和探针组合。
6.根据权利要求5所述试剂盒,其特征在于,所述试剂盒中还包括探针法荧光定量PCR预混液、阳性对照和阴性对照的一种或几种。
7.根据权利要求6所述试剂盒,其特征在于,所述阳性对照含有B646L、eGFP、mCherry和F778R基因,所述阴性对照为ddH2O。
8.根据权利要求5~7任一所述试剂盒,其特征在于,所述检测试剂盒的PCR扩增反应体系为:探针法荧光定量PCR预混液10μL,10μM权利要求1所述引物各0.4μL,10μM所述探针各
0.2μL,核酸模板2μL,ddH2O补至20μL。
9.根据权利要求5~7任一所述试剂盒,其特征在于,所述检测试剂盒的PCR扩增反应条件为:37℃2min;95℃5min;95℃10s,60℃30s,40个循环。